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一种基于通用分选标签质粒的基因转染系统、方法及试剂盒 

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申请/专利权人:山东大学

摘要:本发明涉及一种基于通用分选标签质粒的基因转染系统、方法及试剂盒。为了解决在转染阳性细胞分选中存在的必须在分选标签质粒上进行目的基因克隆构建的问题,本发明提供了一种使用通用分选标签质粒与目的基因质粒共转染的方法,通过细胞分选即可获得目的基因阳性的细胞。经本发明验证,上述使用通用分选标签质粒共转染的方式能够高效富集目的基因阳性细胞,显著提高基因敲低以及基因过表达的水平,获得与单质粒转染体系相当的效果。

主权项:1.一种非治疗目的的基于通用分选标签质粒的基因转染方法,其特征在于,所述方法包括将含有目的基因的质粒与通用分选标签质粒进行共转染;所述基因转染方法,步骤如下:将含有目的基因的质粒与通用分选标签质粒混合后转染宿主细胞,通过荧光显微镜观察荧光表达的情况并通过亲和分选筛选阳性转染细胞;所述通用分选标签质粒的表达框中包括BY55的膜外定位信号肽、绿色荧光蛋白和Twin-Strep-tag的编码序列;所述目的基因质粒中,目的基因为转化至生物体后可以带来预期表型性状的任意序列;包括过表达基因、shRNA、siRNA、sgRNA中的任意一种。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东大学 一种基于通用分选标签质粒的基因转染系统、方法及试剂盒

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