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申请/专利权人：阜外华中心血管病医院
摘要：本发明适用于生物药物技术领域，提供了一种分泌PCSK9纳米抗体的工程益生菌及其构建方法和应用，其中，工程益生菌的构建方法包括以下步骤：在PCSK9纳米抗体序列的前面插入启动子序列、核糖体结合位点序列以及信号肽序列，在PCSK9纳米抗体序列的后面插入流感病毒血凝素抗原标记肽序列，得到目的基因片段；在目的基因片段前后分别加上两个限制性酶切位点，然后经双酶切后连接至同样经双酶切的载体质粒中，得到重组质粒；将重组质粒经电转化至大肠杆菌中，经PCR筛选后获得分泌PCSK9纳米抗体的工程益生菌。该工程益生菌可经过口服进入肠道内定植并分泌PCSK9纳米抗体，阻止PCSK9介导的低密度脂蛋白受体降解，达到降低血脂的目的。
主权项：1.分泌PCSK9纳米抗体的工程益生菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：在PCSK9纳米抗体序列的前面插入用于启动DNA转录的启动子序列、核糖体结合位点序列以及用于纳米抗体分泌至菌体外的信号肽序列，在PCSK9纳米抗体序列的后面插入用作为标签的流感病毒血凝素抗原标记肽序列，得到目的基因片段；其中，所述PCSK9纳米抗体序列如序列表SEQIDNO.1所示；所述信号肽序列如序列表SEQIDNO.2所示；在目的基因片段前后分别加上两个用于重组的限制性酶切位点，然后经双酶切后连接至同样经双酶切的载体质粒中，得到重组质粒；将重组质粒经电转化至大肠杆菌中，经PCR筛选后获得分泌PCSK9纳米抗体的工程益生菌。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 阜外华中心血管病医院 分泌PCSK9纳米抗体的工程益生菌及其构建方法和应用
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