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α-1,4-岩藻糖基化化合物的生产 

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申请/专利权人:因比奥斯公司

摘要:本发明属于合成生物学、代谢工程和细胞培养的技术领域。本发明描述了使用岩藻糖基转移酶生产包含Gal‑β1,3‑[Fuc‑α1,4]‑GlcNAc的岩藻糖基化化合物的方法,以及纯化所述岩藻糖基化化合物的方法,所述岩藻糖基转移酶对Gal‑β1,3‑GlcNAc乳糖‑N‑二糖,LNB和或包含Gal‑β1,3‑GlcNAc的糖底物的Gal‑β1,3‑GlcNAc的N‑乙酰葡糖胺GlcNAc残基具有α‑1,4‑岩藻糖基转移酶活性。本发明还提供一种用于生产包含Gal‑β1,3‑[Fuc‑α1,4]‑GlcNAc的岩藻糖基化化合物的细胞。

主权项:1.一种产生包含Gal-β1,3-[Fuc-α1,4]-GlcNAc的岩藻糖基化化合物的方法,所述方法包括以下步骤:a提供iGDP-岩藻糖,iiGal-β1,3-GlcNAc乳糖-N-二糖,LNB和或包含Gal-β1,3-GlcNAc的糖底物,任选地,所述LNB和或糖底物与肽、蛋白质和或脂质连接,和iii岩藻糖基转移酶,其中所述岩藻糖基转移酶对所述LNB和或所述糖底物的Gal-β1,3-GlcNAc的N-乙酰葡糖胺GlcNAc残基具有α-1,4-岩藻糖基转移酶活性,以及:-包含根据SEQIDNO17、01、02、03、04、05、06、07、08、09、10、11、12、13、14、15、16、18、19、20、21、22或23中任一个的多肽,或-是包含下列氨基酸序列或由下列氨基酸序列组成的多肽,所述氨基酸序列与SEQIDNO17、01、02、03、04、05、06、07、08、09、10、11、12、13、14、15、16、18、19、20、21、22或23中任一个的全长氨基酸序列具有52.50%或更多的序列同一性,或-包含根据SEQIDNO17、01、02、03、04、05、06、07、08、09、10、11、12、13、14、15、16、18、19、20、21、22或23中任一个的多肽的功能片段,或-包含功能片段,所述功能片段包含来自SEQIDNO17、01、02、03、04、05、06、07、08、09、10、11、12、13、14、15、16、18、19、20、21、22或23中任一个的至少10个连续氨基酸残基的氨基酸序列,b在所述岩藻糖基转移酶催化岩藻糖残基从所述GDP-岩藻糖以α-1,4-糖苷键转移到所述LNB和或所述糖底物的Gal-β1,3-GlcNAc的GlcNAc残基的条件下,使所述岩藻糖基转移酶和GDP-岩藻糖与所述LNB和或糖底物接触,导致产生所述岩藻糖基化化合物,c优选地,分离所述产生的岩藻糖基化化合物。

全文数据:

权利要求:

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