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申请/专利权人：北京赛升药业股份有限公司
摘要：本发明涉及药品、生物制品产品领域，具体涉及一种利用发色底物法测定尿激酶活性的方法。本发明提供的发色底物法测定尿激酶活性的方法，是以L‑焦谷氨酰甘氨酸‑L‑精氨酸‑对硝基苯胺盐酸盐作为发色底物，通过建立产物吸光值和尿激酶量的线性关系，并据此计算样品尿激酶的相应酶活；线性关系回归方程为：y＝0.0074x+0.0775，r＝0.9999；其中，x为样品尿激酶的活性；y为样品尿激酶的酶解产物对硝基苯胺在波长405nm处的吸光值。本发明所述的尿激酶活性测定方法使用试剂少、操作相对简单、准确性更高，其板间及板内精密度好，平均回收率高。该方法检测时间更短、尿激酶适用检测范围更宽，可满足现有工业多规格剂量的生产检测需求，具有更高效、更经济的优势。
主权项：1.一种发色底物法测定尿激酶活性的方法，其特征在于，以L-焦谷氨酰甘氨酸-L-精氨酸-对硝基苯胺盐酸盐作为发色底物，通过建立产物吸光值和尿激酶量的线性关系，并据此计算样品尿激酶的相应酶活；线性关系回归方程为：y=0.0074x+0.0775，r=0.9999其中，x为样品尿激酶的活性；y为样品尿激酶的酶解产物对硝基苯胺在波长405nm处的吸光值；所述方法为：将发色底物溶液与样品溶液在酶标板孔中混合均匀；再放入酶标仪中于37℃反应20-25min，测定孔中酶解产物对硝基苯胺的吸光值A405，代入上述线性关系回归方程，计算样品尿激酶的活性；所述发色底物的添加量相对样品为过量添加；所述样品溶液的浓度为20-100UmL；所述发色底物溶液的浓度为0.5mmolL；所述样品溶液和发色底物溶液均采用缓冲液配制；所述缓冲液为pH=8.8明胶-Tris缓冲液；反应过程中不使用终止剂。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京赛升药业股份有限公司 一种发色底物法测定尿激酶活性的方法
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