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申请/专利权人：合肥瀚微生物科技有限公司
摘要：本发明提供了一种基于质谱检测肠道内单个细菌代谢物的方法，包括：在无菌小鼠中定殖单种细菌，将无菌鼠肠道内的微生物制备细菌悬液，在毛细管中注入溶液，推出毛细管中的溶液覆盖单个细菌，对单个细菌的代谢物进行提取，向毛细管施加电压，通过质谱检测肠道内细菌的代谢物。本发明提供的方法无需进行裂解、色谱分离等繁琐的前处理过程，即可实现对肠道样本中单个微生物的代谢组检测，与目前的肠道内容物整体质谱分析相比，具有将细菌代谢组与宿主细胞、食物来源代谢物相区分的能力，能够检测细菌群体中每个细菌个体独特的代谢组差异，且可与体外培养的细菌代谢物相区分，具有高精度、快速、非靶向等优点。
主权项：1.一种基于质谱检测肠道内单个细菌代谢物的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1）：经定殖检测确定在无菌小鼠中定殖了单种细菌；步骤（2）：处死小鼠，取小鼠肠道；步骤（3）：将定殖了单种细菌的小鼠肠道在不同肠段的交汇处剪断，分别获取小鼠不同肠段；步骤（4）：分别灌洗步骤（3）中小鼠肠道，冲洗出小鼠肠道中的细菌，得到含有细菌的灌肠溶液；步骤（5）：将步骤（4）中的灌肠溶液过大孔径滤网，所述大孔径滤网的滤孔大小为10-70μm；步骤（6）：将步骤（5）获得的细菌溶液离心、收集菌体，用无菌溶液重悬；步骤（7）：将步骤（6）所得的细菌溶液滴加在载玻片上，将细菌固定在玻璃片上；步骤（8）：毛细管内注入溶液，在显微镜下推出溶液，使溶液刚好覆盖单个细菌，待细菌内的代谢物扩散到溶液中后吸回溶液，完成对单个细菌代谢物的提取；所述溶液包括甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、氯仿、甲酸、乙酸或上述与水的混合溶液中的一种或两种以上；步骤（9）：在步骤（8）的毛细管中施加电压，通过质谱检测单个细菌内的代谢物信号。
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权利要求：
百度查询： 合肥瀚微生物科技有限公司 一种基于质谱检测肠道内单个细菌代谢物的方法
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