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一种生产依克多因的重组菌及其构建方法和应用 

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申请/专利权人:山东君泰药业有限公司

摘要:本发明提供了一种生产依克多因的重组菌及其构建方法和应用,属于生物技术领域。本发明以E.coliK12MG1655为出发菌株,将依克多因合成基因ectABC直接整合进入出发菌株基因组,继续将依克多因合成相关基因pk、ppc、pyc、aspC、aspA、gdh、askM68V、asd以特定位点整合到lysA、thrA、iclR、argA、proB敲除株中,进而获得高产依克多因的重组菌,实现了依克多因稳定高效合成,从而有效满足实际生产需求。

主权项:1.一种生产依克多因的重组菌,其特征在于,所述重组菌通过在底盘菌中过表达依克多因合成相关基因和谷氨酸脱氢酶基因gdh,同时敲除底盘菌中依克多因合成竞争通路相关基因、谷氨酸代谢相关基因和异柠檬酸裂解酶抑制因子基因iclR构建获得;其中,所述依克多因合成相关基因包括丙酮酸激酶合成基因pk、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶合成基因ppc、丙酮酸羧化酶合成基因pyc、天冬氨酸氨基转移酶合成基因aspC、天冬氨酸酶合成基因aspA、天冬氨酸激酶合成基因askM68V、天冬氨酸半醛脱氢酶合成基因asd、四氢嘧啶合成酶基因簇ectABC;所述依克多因合成竞争性通路相关基因包括赖氨酸合成通路基因lysA、苏氨酸合成通路基因thrA;所述谷氨酸代谢相关基因包括精氨酸合成通路基因argA、脯氨酸合成通路基因proB;所述四氢嘧啶合成酶基因簇ectABC的核酸序列如SEQIDNO.1所示;所述天冬氨酸激酶合成基因askM68V的核酸序列如SEQIDNO.2所示;所述丙酮酸激酶合成基因pk的核酸序列如SEQIDNO.3所示;所述磷酸烯醇丙酮酸羧化酶合成基因ppc的核酸序列如SEQIDNO.4所示;所述丙酮酸羧化酶合成基因pyc的核酸序列如SEQIDNO.5所示;所述天冬氨酸氨基转移酶合成基因aspC的核酸序列如SEQIDNO.6所示;所述天冬氨酸酶合成基因aspA的核酸序列如SEQIDNO.7所示;所述天冬氨酸半醛脱氢酶合成基因asd的核酸序列如SEQIDNO.8所示;所述谷氨酸脱氢酶基因gdh的核酸序列如SEQIDNO.9所示。

全文数据:

权利要求:

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