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申请/专利权人：中山大学

摘要：本发明公开了一种基于氧化糖原与脱细胞外基质的3D打印墨水及其制备方法和应用。所述3D打印墨水由脱细胞外基质溶液和氧化糖原组成，所述脱细胞外基质的质量百分浓度为2～3%，氧化糖原的质量百分浓度为1%～2%。本发明通过使用氧化改性后的氧化糖原作为脱细胞外基质溶液的交联剂，dECM的氨基可与氧化糖原的醛基形成希夫碱键，引入动态共价键，通过化学交联的方式提高脱细胞外基质的机械性能以实现3D打印，同时氧化糖原的加入不会影响dECM的剪切稀化能力，且墨水在打印后保持结构完整，抵抗坍塌的能力逐渐提升。而且氧化糖原与脱细胞外基质交联后的支架具有良好生物相容性和生物可降解性。

主权项：1.一种氧化糖原脱细胞外基质3D打印墨水，其特征在于，所述3D打印墨水由脱细胞外基质溶液和氧化糖原组成；所述脱细胞外基质的质量百分浓度为2～3%，氧化糖原的质量百分浓度为1%～2%；所述脱细胞外基质为骨组织脱细胞外基质；所述骨组织脱细胞外基质的提取方法如下：S1.将新鲜牛骨在生理盐水中加热，取出后解剖表面软组织；S2.解剖去除其皮质骨和软骨部分，将松质骨部分分离；S3.将松质骨置于纯水中搅拌，洗去残余组织；S4.将清洗干净的松质骨冷冻；S5.在低温状态下将松质骨粉碎，获得松质骨颗粒；S6.将松质骨颗粒加入纯水中搅拌，过滤；S7.将抗生素药剂加入细胞等渗溶液中，配置得到含抗生素的细胞等渗溶液；S8.使用S7配制得到的溶液再次清洗松质骨颗粒；S9.将松质骨颗粒用纯水清洗后，冻干；S10.在松质骨颗粒中加入盐酸，搅拌，得松质骨颗粒酸性混合物；S11.将S10所得混合物离心，取沉淀用纯水清洗；S12.用氯仿甲醇混合液浸泡S11所得固体物，然后用甲醇冲洗，再用纯水冲洗，冻干；S13.将S12所得产物加入含胰蛋白酶和EDTA的细胞等渗溶液中，搅拌；S14.将S13所得产物用细胞等渗溶液冲洗，然后在低温下用含抗生素的细胞等渗溶液搅拌，然后冻干；S15.在盐酸溶液中配置胃蛋白酶溶液，将S14中的产物加入到胃蛋白酶溶液中，搅拌；S16.配置NaCl溶液；S17.将S15所得溶液过滤后等体积缓慢滴加入S16配置的NaCl溶液中搅拌，再在低温下搅拌，过滤得到白色蛋白质团块；S18.将S17所得固体用纯水清洗后放入透析袋中透析，得到透明黏稠液体，冻干即得骨组织脱细胞外基质；所述氧化糖原的制备方法包括如下步骤：S1.将糖原溶解在纯水中制备糖原溶液；S2.将高碘酸钠溶解在纯水中制备高碘酸钠氧化液；S3.将高碘酸钠氧化液加入糖原溶液中，3℃～5℃环境下避光搅拌反应；S4.将混合物冷冻过夜；S5.将冷冻的反应混合物在室温下解冻，离心得到白色固体，冷水洗涤若干次后，再用乙醇、丙酮、乙醚分别洗涤，最后再真空干燥得到白色粉末状氧化糖原固体。

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