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申请/专利权人：广东筑美生物医疗科技有限公司
摘要：本发明公开了一种重组人源弹性蛋白肽及其表达方法与重组质粒，属于基因工程技术领域；本发明对弹性蛋白关键疏水六肽重复序列GVGVAP、疏水五肽重复序列VGVPG和RGD细胞粘附序列进行改造设计，将RGDVGVAPGVGVAPGVGVAPGVGVAPGVGVAPGVGVAPG氨基酸序列和RGDVPGKGVPGKGVPGKGVPGKGVPGKGVPGKG氨基酸序列重复5次，其中弹性蛋白疏水重复序列VGVPG中的第四位疏水脯氨酸残基替换成亲水赖氨酸残基，得到弹性蛋白片段RGD‑ELP，优化合成弹性蛋白片段RGD‑ELP的密码子，通过PCR克隆获取连接片段，将克隆得到的弹性蛋白片段RGD‑ELP和表达载体pPIC9K片段混合，利用GibsonAssembly无缝连接技术进行连接，得到所述重组质粒，命名为pPIC9K‑RGD‑ELP；所述重组质粒经巴斯德毕赤酵母细胞GS115可以高效表达具有高效黏附活性的重组人源弹性蛋白肽，且蛋白的抗氧化活性和还原能力更高。
主权项：1.一种重组人源弹性蛋白肽重组质粒的构建方法，其特征在于，所述重组质粒根据毕赤酵母的密码子偏好性优化合成弹性蛋白片段RGD-ELP的密码子，通过PCR克隆获取连接片段，将克隆得到的弹性蛋白片段RGD-ELP和表达载体pPIC9K片段混合，利用GibsonAssembly无缝连接技术进行连接，得到所述重组质粒，命名为pPIC9K-RGD-ELP。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广东筑美生物医疗科技有限公司 一种重组人源弹性蛋白肽及其表达方式与重组质粒
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