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一种脐血单个核细胞的提取分离方法及应用 

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申请/专利权人:广东龄值生物科技有限公司

摘要:本发明提出了一种脐血单个核细胞的提取分离方法及应用,属于干细胞技术领域。包括:S1.取新生儿脐带血,接种于消毒液中,孵育,培养至细胞生长融合后,杀菌,制得脐带间充质干细胞悬液;S2.向新鲜脐带血中加入沉淀剂,吸取上层细胞液加入含人淋巴细胞分离液中,离心,收集细胞,洗涤,制备成脐血混合细胞悬液;S3.向脐血混合细胞悬液中加入重组人干细胞因子、促血小板生成素、人参皂苷Rg1,搅拌混合均匀,接种脐带间充质干细胞悬液,孵育,离心,收集固体细胞,洗涤,分散于培养基中,制得脐血单个核细胞悬液。本发明促进脐血单个核细胞扩增,有很好的免疫效果,提高脐血单个核细胞的稳定性,促进其体外扩增,具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种脐血单个核细胞的提取分离方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.脐带间充质干细胞悬液的制备:取新生儿脐带血,制备成脐血细胞悬液,接种于消毒液中,孵育,培养至细胞生长融合后,杀菌,制得脐带间充质干细胞悬液;S2.脐血混合细胞悬液的制备:向新鲜脐带血中加入沉淀剂,吸取上层细胞液加入含人淋巴细胞分离液中,离心,收集细胞,洗涤,加入IMDM培养基中制备成脐血混合细胞悬液;S3.脐血单个核细胞悬液的体外扩增:向步骤S2中制得的脐血混合细胞悬液中加入重组人干细胞因子SCF、促血小板生成素TPO、人参皂苷Rg1,搅拌混合均匀,接种步骤S1制得的脐带间充质干细胞悬液,孵育,离心,收集固体细胞,洗涤,分散于IMDM培养基中,制得脐血单个核细胞悬液。

全文数据:

权利要求:

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