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申请/专利权人：湖南大学
摘要：本发明属于高通量测序技术领域，具体涉及一种同时对tRNA及其裂解产生的tsRNA进行定量的高通量测序方法。本发明公开了一种同时对tRNA及其裂解产生的tsRNA进行定量的高通量测序方法，所述高通量测序方法包含以下步骤：1总RNA提取、氧化与β消除；2分离tRNA和tsRNAs；3对tRNA和tsRNAs去甲基化；4对tRNA和tsRNAs去3’磷酸；5对tRNA和tsRNAs连接3’接头序列；6对tRNA和tsRNAs连接5’接头序列后混合；6反转录成cDNA；7PCR扩增；8测序。本发明的方法能同时针对tRNA及其裂解产生的tsRNAs进行测序和准确的定量。
主权项：1.一种同时对tRNA及其裂解产生的tsRNA进行定量的高通量测序方法，其特征在于，所述高通量测序方法包含以下步骤：1总RNA提取、氧化与β消除；2分离tRNA和tsRNAs；3对tRNA和tsRNAs去甲基化；4在步骤3的基础上，对tRNA和tsRNAs去3’磷酸；5在步骤4的基础上，对tRNA和tsRNAs连接3’接头序列；所述tRNA的3’接头序列为：NNGATGCATACAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA；其中tsRNA所述的3’接头序列为：NNGATTCTAGCAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA；N为随机碱基，A、T、G、C和U中的一种；6在步骤5的基础上，对tRNA和tsRNAs连接5’接头序列后混合；所述3’接头序列为ACACUCUUUCCCUACACGACGCUCUUCCGAUCUNNNN；N为随机碱基，A、T、G、C和U中的一种；6反转录成cDNA；7PCR扩增；8测序。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖南大学 同时对tRNA及其裂解产生的tsRNA进行定量的高通量测序方法
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