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申请/专利权人：青岛大学
摘要：本发明公开了一种DNA中8‑氧‑2’脱氧鸟嘌呤修饰单碱基分辨率定位分析方法，属于生物技术领域。首先提取基因组DNA,超声打断，然后变性为单链DNA再用抗体富集含8‑oxo‑dG的单链DNA；再将富集得到的单链DNA加上3’5’通用测序接头；将氨基修饰延伸引物固定至羧基修饰磁珠，得到羧基修饰磁珠固定的延伸引物；通过羧基修饰磁珠固定的延伸引物延伸，DNA聚合酶介导富集的单链DNA中8‑氧‑2’脱氧鸟嘌呤‑胸腺嘧啶转换，得到固定在磁珠的引物延伸产物；纯化固定在磁珠的引物延伸产物；PCR扩增引物延伸产物，并进行酶切或测序分析。上述方法反应体系温和，避免现有化学标记方法中可能人为引入DNA氧化修饰的弊端，通过GT转换，更直接、准确地对8‑oxo‑dG修饰定位分析。
主权项：1.一种DNA中8-氧-2’脱氧鸟嘌呤修饰单碱基分辨率定位分析方法，其特征在于，包括以下步骤：1提取基因组DNA,超声打断至250bp；2变性为单链DNA再用抗体富集含8-oxo-dG的单链DNA；3将富集得到的单链DNA加上3’5’通用测序接头；4将氨基修饰延伸引物固定至羧基修饰磁珠，得到羧基修饰磁珠固定的延伸引物；5通过羧基修饰磁珠固定的延伸引物延伸，DNA聚合酶介导步骤3中富集的单链DNA中8-氧-2’脱氧鸟嘌呤-胸腺嘧啶转换，得到固定在磁珠的引物延伸产物；6纯化固定在磁珠的引物延伸产物；7PCR扩增引物延伸产物，并进行酶切或测序分析。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 青岛大学 一种DNA中8-氧-2’脱氧鸟嘌呤修饰单碱基分辨率定位分析方法
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