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申请/专利权人:华中农业大学
摘要:本发明属于水产动物分子标记领域。具体涉及一种鉴定克氏原螯虾Toll3、Toll4基因SNP位点优势抗病单倍型的KASP标记及其应用。Toll3‑Hap1和Toll4‑Hap1为抗病优势单倍型,对应SNP位点分别位于NC_059655.1染色体上第5956622、5957405、5958851、5863494、5862294位碱基,对细菌、双基因单倍型组合Toll3‑Hap1+Toll4‑Hap1为一定的抗病优势。本发明KASP标记可满足克氏原螯虾抗病分子辅助选择。
主权项:1.一个筛选克氏原螯虾Toll3基因SNP位点的引物组合,其特征在于,所述引物组合的核苷酸序列如下所示:正向引物Toll3-F1:5’-CAACAACATCCCAGAACAGA-3’,反向引物Toll3-R1:5’-GGGTTGCCTTGAAAATACAC-3’;正向引物Toll3-F2:5’-CCCTACAAGAAATGGAATAT-3’,以及反向引物Toll3-R2:5’-GAGAATGCAGAAATGACCTA-3’;PCR反应体系为:10μL2×PCRMix、上下游引物各1μL、cDNA1μL、ddH2O7μL;PCR反应条件为:95℃预变性5min;95℃变性30sec,55℃退火30sec,72℃延伸1min,35次循环;72℃延伸10min;用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物大小和质量;将PCR产物送至测序公司进行测序,经过比对后确定克氏原螯虾Toll3基因存在3个SNP位点,分别位于克氏原螯虾染色体NC_059655.1的第5956622、5957405和5958851位碱基。
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百度查询: 华中农业大学 一种鉴定克氏原螯虾Toll3和Toll4基因SNP抗病优势单倍型的KASP标记及其应用
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