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申请/专利权人：贵州大学

摘要：本发明公开了一种同时检测猕猴桃果酒中34种羰基化合物的方法，属于酒类检测技术领域。本发明同时检测猕猴桃果酒中34种羰基化合物的方法，该方法是先采用衍生化试剂与羰基类化合物进行衍生化反应，然后再结合UPLC‑MSMS同时检测果酒中的挥发性酸类、不挥发酸类、挥发性醛类、不挥发醛类共34种羰基类化合物，且该方法的灵敏度高，检测限低，能够广泛应用于果酒中羰基类化合物高效灵敏的检测。

主权项：1.一种同时检测猕猴桃果酒中34种羰基化合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（1）猕猴桃果酒衍生化处理取猕猴桃果酒样品，先加入同位素内标丙酸-d6溶液、苯乙酮-d3溶液和壬醛-d18溶液，再加入衍生化试剂3-硝基苯肼盐酸盐溶液及催化剂N-3-二甲氨基丙基-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐和吡啶，进行衍生化反应，反应结束后，过膜，即得待测液；所述衍生化反应的体系为每40μL的猕猴桃果酒样品中分别加10μL浓度为500μgL的内标溶液，丙酸-d6溶液、苯乙酮-d3溶液和壬醛-d18溶液的浓度均为500μgL，20μL浓度为200mmolL的3-硝基苯肼盐酸盐溶液，20μL浓度为120mmolL的N-3-二甲氨基丙基-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液，其中含有6%的吡啶，再添加910μL的体积分数为50%乙腈水至1mL；（2）标准曲线的建立将34种羰基化合物混合溶解，配置成一系列浓度的标准溶液，并在标准溶液中加入同位素内标溶液和衍生化试剂及催化剂进行衍生化反应；反应结束后，采用UPLC-MSMS测定，以每种羰基类化合物与相对应的同位素内标的峰面积比值作为纵坐标，每种羰基类化合物与相对应的同位素内标的浓度比值作为横坐标，构建定量关系模型；所述UPLC-MSMS检测的质谱条件：离子源为ESI负离子模式，离子源温度110~120℃，去溶剂温度500~550℃，毛细管电压2~3KV，碰撞电压13~30eV，锥孔电压为21~37V，锥孔气流50Lh，去溶剂气流800Lh；所述UPLC-MSMS检测的色谱条件：C18色谱柱100mm×2.1mm,1.7μm；柱温40℃；流动相A：水+5mmolL乙酸铵+0.1%甲酸；B：乙腈水955，vv+5mmolL乙酸铵+0.1%甲酸；流速0.3mLmin；进样量10μL；梯度洗脱的程序为0-1min，B18%，1-11min，B45%，11-15min，B65%，15-17，B100%，17-19.5min，B100%，19.5-20min，B18%，20-23min，B18%；其中34种羰基化合物包括酸类、醛类、酮类化合物；酸类化合物相对应的同位素内标物为丙酸-d6；醛类化合物相对应的同位素内标物为壬醛-d18；酮类化合物相对应的同位素内标物为苯乙酮-d3；（3）34种羰基化合物测定将步骤（1）的待测液，采用UPLC-MSMS进行检测，根据检测的待测液中各个化合物与相对应的同位素内标物的峰面积比值，并依据步骤（2）建立的定量关系模型，计算出猕猴桃果酒34种羰基化合物的含量。

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