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一种自噬激活的间充质干细胞外泌体、其制备方法及应用 

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申请/专利权人:广东医科大学附属医院

摘要:本发明属于生物医药技术领域,公开了一种自噬激活的间充质干细胞外泌体、其制备方法及应用。本发明的自噬激活的间充质干细胞外泌体采用雷帕霉素培养激活。本发明直制备的自噬激活的间充质干细胞外泌体具有更强的免疫抑制功能,优于未诱导自噬激活的外泌体,将所述自噬激活的间充质干细胞外泌体在制备治疗和或预防系统性红斑狼疮药物中应用,能够显著降低狼疮血清抗dsDNA抗体、ANA水平,降低尿蛋白水平,改善狼疮肾脏病理,减少肾脏免疫复合物沉积。为干细胞外泌体应用于系统性红斑狼疮的临床治疗提供了有力工具。

主权项:1.自噬激活的间充质干细胞外泌体在制备治疗和或预防系统性红斑狼疮药物中的应用,其特征在于,所述自噬激活采用浓度为5μM的雷帕霉素培养激活;所述间充质干细胞为人脐带间充质干细胞;所述自噬激活的间充质干细胞外泌体的制备方法包括以下步骤:S1:将间充质干细胞按适宜密度均匀接种在含10%FBS、1%双抗的α-MEM培养基中,置于37℃、5%CO2培养箱中培养;当细胞融合度达到60%~70%时,吸弃旧培养基,PBS洗2~3次,更换含雷帕霉素、10%无外泌体血清、1%双抗的α-MEM培养基,置于37℃、5%CO2培养箱中培养48h~60h,得自噬激活间充质干细胞;S2:收集所述自噬激活间充质干细胞的培养上清,超速离心后,PBS重悬,滤膜过滤弃滤液,即得自噬激活的间充质干细胞外泌体;所述超速离心具体为:4℃、300g,离心10min~15min,收集上清;4℃、2000g,离心20min~25min,收集上清;4℃、10000g,离心60min~65min,收集上清;4℃、100000g,离心90min~95min,弃上清。

全文数据:

权利要求:

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