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申请/专利权人：深圳市儿童医院
摘要：本发明公开了一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用。本发明的混合培养包皮获得间充质干细胞的方法包括将N份不同来源的包皮与培养基混合，培养，得到P0代间充质干细胞；所述N大于等于2。采用本发明的方法能够获得功能稳定、均一，且适合临床使用的间充质干细胞。
主权项：1.一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法，其特征在于，包括：（1）将等量的N份不同来源的包皮真皮组织与培养基混合，培养，得到P0代间充质干细胞，其中，所述N等于2或3，所述包皮真皮组织的获取方法为：步骤S1、将包皮环切术后的包皮依次用碘伏浸泡、酒精消毒和磷酸盐缓冲盐水清洗后备用，其中所述碘伏浸泡时间为1min~3min，酒精消毒的时间为30s~90s；步骤S2、对所述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将所述真皮切成小块形成组织匀浆即得；所述培养基为含青霉素链霉素的间充质干细胞无血清培养基；（2）将P0代间充质干细胞悬液与微载体培养液混合培养，沉淀微载体和间充质干细胞，加入胰蛋白酶消化，消化完成后收集上清液中的间充质干细胞即可；其中，所述P0代间充质干细胞悬液的细胞接种浓度为5×103cellscm2~7×103cellscm2；所述微载体培养液中所述微载体的浓度为2gL~4gL；所述P0代间充质干细胞悬液与微载体培养液的体积比为1：10~30；所述微载体培养液的制备方法包括：步骤S01、取Cytodex1微载体用杜氏磷酸缓冲盐溶液泡发2.5h~3.5h，沉淀Cytodex1微载体，再用杜氏磷酸缓冲盐溶液洗涤；步骤S02、将洗涤后的所述Cytodex1微载体浸泡于杜氏磷酸缓冲盐溶液，灭菌后沉淀，弃上清，加入间充质干细胞无血清培养基后即得。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳市儿童医院 一种混合培养包皮获得间充质干细胞的方法及其应用
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