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一种检测革兰氏阴性细菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用 

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申请/专利权人:华南农业大学

摘要:本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种检测革兰氏阴性菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用;本发明报告基因质粒载体包括pFA‑Gm和或pFA‑Kan质粒,pFA‑Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因,pFA‑Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2,pFA‑Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签;报告基因质粒为将报告基因片段连接到报告基因质粒载体上而得到;本发明通过报告基因质粒实现对革兰氏阴性细菌中基因启动子转录活性的评估,较实时荧光定量PCR技术的成本以及操作难度更低。

主权项:1.一种检测革兰氏阴性细菌启动子转录活性的报告基因质粒载体,其特征在于,包括pFA-Gm质粒和或pFA-Kan质粒;所述pFA-Gm质粒包括复制子元件、mob元件以及筛选标记庆大霉素抗性基因,其中复制子元件包括pBBR1OriV和pBBR1Rep,pFA-Gm质粒的多克隆位点区域两侧分别含有大肠杆菌编码核糖体RNA的rrnB基因的终止区T1和T2,pFA-Gm质粒的多克隆位点的3′端方向含有1×Flag标签;所述多克隆位点区域含有多克隆位点SfcⅠ、PstⅠ、SphⅠ、HindⅢ、SalⅠ、XbaⅠ、BanⅠ和KpnⅠ,用于插入启动子序列;所述pFA-Kan质粒为将所述pFA-Gm质粒中的筛选标记庆大霉素抗性基因替换为筛选标记卡那霉素抗性基因得到。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华南农业大学 一种检测革兰氏阴性细菌启动子转录活性的报告基因质粒载体、质粒及应用

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