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一种嵌合酶及其在体外一步反应合成Cap0 mRNA的用途和方法 

申请/专利权人:苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

申请日:2021-09-24

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN113862235B

主分类号:C12N9/12

分类号:C12N9/12;C12N9/10;C12N9/14;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/19

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.07.05#授权;2022.01.21#实质审查的生效;2021.12.31#公开

摘要:本发明涉及分子生物学领域,特别是一种嵌合酶及其在体外转录中一步合成Cap0mRNA的用途和方法,所述方法包括利用嵌合酶和体外转录模板混合后共反应,一步反应获得加帽加尾的mRNA产物,所述嵌合酶包括RNA聚合酶结构域和加帽酶催化结构域,所述嵌合酶经嵌合设计具备体外转录和加帽的双重功能。本发明开辟了体外酶法一步合成mRNA的方法,提高了合成效率和mRNA产率。

主权项:1.一种用于体外酶法一步合成mRNA的嵌合酶,所述嵌合酶为转录加帽嵌合酶,其特征在于,所述嵌合酶由加帽酶催化结构域和RNA聚合酶结构域组成,所述RNA聚合酶结构域包括RNA聚合酶和SpyCatcher,其氨基酸序列如SEQIDNO.11所示;所述加帽酶催化结构域包括病毒加帽酶和SpyTag,其氨基酸序列如SEQIDNO.12所示;所述嵌合酶中SpyTag和SpyCatcher共价结合;所述RNA聚合酶结构域和加帽酶催化结构域中均还包括蛋白纯化标签;所述嵌合酶中RNA聚合酶通过第一连接肽和SpyCatcher连接,所述病毒加帽酶通过第二连接肽和SpyTag连接。

全文数据:

权利要求:

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