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一种基于dCasRx-NSUN6单基因特异性M5C修饰编辑方法 

申请/专利权人:吉林大学

申请日:2022-11-15

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN115820603B

主分类号:C12N9/22

分类号:C12N9/22;C12N15/113;C12N15/63;C12N15/85;A61K38/46;A61K48/00;A61P43/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.07.05#授权;2023.04.07#实质审查的生效;2023.03.21#公开

摘要:本发明提供了一种靶向RNA的5‑甲基胞嘧啶修饰编辑系统,所述编辑系统包括失活的CasRx核酸酶融合5‑甲基胞嘧啶修饰酶及其酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向RNA至少一个位点的crRNA表达载体。进一步的本发明还靶向RPSA的mRNA的CDS区中一个位点的crRNA表达载体。本发明还提供了靶向RNA的5‑甲基胞嘧啶修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明提供的编辑系统,可以对RNA5‑甲基胞嘧啶修饰位点进行靶向修饰5‑甲基胞嘧啶,准确高效。

主权项:1.一种靶向RNA5-甲基胞嘧啶修饰的编辑系统,包括失活的CasRx核酸酶系统和crRNA系统,其特征在于,所述失活的CasRx核酸酶系统中所述失活的CasRx核酸酶与5-甲基胞嘧啶修饰酶和或5-甲基胞嘧啶修饰酶活性功能区融合,所述失活的CasRx核酸酶系统包括失活的CasRx核酸酶蛋白表达载体,所述失活的CasRx核酸酶蛋白表达载体包括PCS2-EF1α-dCasRx-NSUN6-T2A-EGFP载体和或PCS2-EF1α-dCasRx-NSUN6酶活性功能区-T2A-EGFP载体,包括如下序列:a如SEQIDNO.1所示的EF1α-SV40-NLS-dCasRx序列;b如SEQIDNO.2所示的NSUN6序列和或如SEQIDNO.3所示的NSUN6酶活性功能区序列;c如SEQIDNO.4所示的EGFP序列;所述crRNA系统为序列如SEQIDNO.15所示的crRNA表达载体。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 吉林大学 一种基于dCasRx-NSUN6单基因特异性M5C修饰编辑方法

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