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一种细胞培养基提取外泌体的方法 

申请/专利权人:四川天府亨特生命科技有限公司

申请日:2024-04-07

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN118006550B

主分类号:C12N5/0775

分类号:C12N5/0775

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.07.05#授权;2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开

摘要:本发明涉及外泌体提取技术领域,具体涉及一种细胞培养基提取外泌体的方法,包括以下步骤:S1.将细胞培养基溶液进行预处理得到含外泌体的细胞培养液;S2.将所述含外泌体的细胞培养液进行初滤;S3.初滤后的过滤液放入到分子量5K~50K的透析袋进行透析浓缩,将初滤后的过滤液浓缩到原有体积1~10%,得到浓缩后的滤液;S4.将浓缩后的滤液放入到截留分子量100K~800K透析袋中进行二次透析,透析到透析液中检测不到蛋白质;S5.收集二次透析后的滤过液。本发明收集的外泌体采用透析袋过滤系统,可以确保提取的外泌体为纳米级;过程中不使用到昂贵的设备或是试剂,提取出来的细胞培养基外泌体内含丰富的活性物质,减少了高速的机械损伤,分离效率高,成本低。

主权项:1.一种细胞培养基提取外泌体的方法,其特征在于:包括以下步骤:S1.将细胞培养基溶液进行预处理得到含外泌体的细胞培养液;S2.将所述含外泌体的细胞培养液进行初滤;S3.初滤后的过滤液放入到分子量10K-50K的透析袋进行透析脱水浓缩,将初滤后的过滤液浓缩到原有体积1~10%,得到浓缩后的滤液;S4.将浓缩后的滤液放入到截留分子量100K-800K透析袋中进行二次透析,透析到透析液中检测不到蛋白质;S5.收集二次透析后的滤过液;所述步骤S3中透析袋外面的透析液为高渗透压高分子溶液,所述高渗透压高分子溶液为聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯或甲基纤维素,所述高渗透压高分子溶液的分子量为20K或100K,质量浓度为50%-80%;所述步骤S4中二次透析的透析液为0.9%生理食盐水,所述0.9%生理食盐水溶有500K或1000K分子量的高分子溶液,500K或1000K分子量的高分子溶液为聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯或甲基纤维素的溶液,500K或1000K分子量的高分子溶液溶于生理食盐水后质量浓度为10%-20%。

全文数据:

权利要求:

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