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一种霞多丽葡萄单芽茎段诱导愈伤及组培快繁方法 

申请/专利权人:山西大学

申请日:2023-05-12

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN116548306B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00;A01H6/88

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.07.05#授权;2023.08.25#实质审查的生效;2023.08.08#公开

摘要:本发明属于农业科学技术领域,具体涉及一种霞多丽葡萄单芽茎段诱导愈伤及组培快繁方法。为建立系统的霞多丽葡萄离体再生组培快繁体系,本发明包括以下步骤:愈伤组织的诱导、不定芽分化、生根培养及炼苗移栽。本发明采用植物组织培养技术成功实现霞多丽葡萄单芽茎段诱导愈伤及离体再生,霞多丽葡萄单芽茎段诱导愈伤的出愈率可达100%,出芽率可达60.0%以上,生根率可达50.0%左右,最后炼苗移栽成活率可达90.0%以上,再生体系相较于其他再生体系,其诱导愈伤及不定芽产生可同时进行,大大缩短了其再生周期,且短时间内可获得大量无菌植株。

主权项:1.一种霞多丽葡萄单芽茎段诱导愈伤及组培快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,愈伤组织的诱导:选取生长4~5周的霞多丽葡萄幼嫩组培苗为材料,去除叶片,将其剪成单芽茎段,竖直插入诱导愈伤组织培养基中进行培养,在温度为25±1℃,光照强度为≥3000Lx,光周期为16h黑暗8h光照的条件下培养,得到发绿的愈伤组织团块;步骤2,不定芽诱导:在步骤1诱导愈伤的基础上,同时其愈伤上部芽也在不断生长,故在诱导愈伤同时对其上部芽进行修剪,在此过程中便可获得不定芽用于生根培养;步骤3,生根培养:取步骤2中获得的不定芽,将其接种到生根培养基中,在温度为25±1℃,光照强度为≥3000Lx,光周期为16h黑暗8h光照的条件下培养,得到生根成苗的无菌植株;步骤4,炼苗移栽:选取步骤3生根成苗的无菌植株,高度为4-5cm的试管苗,在将其移至灭过菌的土中,喷洒水分并用保鲜膜封闭包裹三天,放于温室培养,之后每天向其内部喷洒水分,保证其生长环境足够湿润,在此过程中,逐渐将保鲜膜缓慢打开,使其逐渐适应温室环境,直到一周后便可完全揭开包裹的保鲜膜;所述步骤1中诱导愈伤组织培养基的配方为:在MS培养基中每升添加1.0mg的6-苄氨基嘌呤、0.2mg的吲哚丁酸、0.1mg的α-萘乙酸、20g蔗糖和7g琼脂粉,pH值为5.8~6.0;所述步骤2中不定芽诱导使用的培养基与步骤1相同,诱导愈伤及分化的继代培养换到相同的重新配置的培养基即可;所述步骤3中生根培养基的配方为:MS培养基添加0.4mgL6-苄氨基嘌呤、0.4mgL吲哚乙酸、30gL蔗糖、6gL琼脂和0.5gL活性炭,pH值为5.8~6.0;或为:34体积的MS培养基添加0.4mgL吲哚丁酸、30gL蔗糖、6.5gL琼脂,pH值为5.8~6.0。

全文数据:

权利要求:

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