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一种细菌基因可视化检测方法 

申请/专利权人:四川大学

申请日:2024-04-16

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN118291655A

主分类号:C12Q1/689

分类号:C12Q1/689;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/42

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开

摘要:本发明公开了一种细菌基因可视化检测方法。通过在扩增引物上人为添加错配,实现对具有单碱基差异的食源性致病菌基因组DNA的识别,利用SYBRGreen染料嵌入双链核酸形成的复合物能够在蓝光的照射下使得三线氧变为单线氧,进而促进TMB试剂转化为oxTMB的性质,实现单碱基突变信号的可视化输出转化。基于重组酶聚合酶恒温扩增与蓝光显色方法结合的细菌基因可视化检测的设计策略可以在38℃实现核酸扩增效果,无需笨重的仪器、复杂的试剂和变温过程,操作简便,1h内就能实现对于耐药结果的可视化。因此,本发明开发的一种细菌基因可视化检测方法,能够实现对于食源性致病菌基因的可视化检测。

主权项:1.一种细菌基因可视化检测方法,其特征在于基于重组酶聚合酶恒温扩增和光敏催化反应结合,利用在重组酶聚合酶恒温扩增引物上人为添加错配,实现对于单碱基突变位点的识别,通过将扩增产物加入含有SYBRGreenI染料、TMB试剂的溶液中,利用SYBRGreen染料和核酸双链结合形成的复合物能够在蓝光的照射下使得TMB试剂氧化为oxTMB的性质,实现简单、快速、特异性检测沙门氏菌病原菌中单碱基突变位点的效果。

全文数据:

权利要求:

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