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申请/专利权人：武汉工程大学
申请日：2024-04-02
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118291568A
主分类号：C12P21/06
分类号：C12P21/06;A61K38/01;A61P31/04;C07K1/14;C07K1/20
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：本发明提出了一种黑水虻富抗菌肽药物提取纯化方法，其包括超声辅助复合酶法、自交联囊泡双水相体系和分子印迹反相洗脱等步骤。本发明中双水相体系采用自交联共轭亚油酸CLA囊泡稳定PEGDEX双水相乳液，可克服水‑水界面张力低、厚度大的局限性，对蛋白质具有良好的分配性，可作为生物矿化模板，实现更优良的分离效果。采用的反相洗脱分子印迹聚合物吸附剂MIPs是一类具有特定识别位点的合成材料，可以通过从聚合物中去除模板后留下的特定印迹空腔，实现样品中抗菌肽的选择性识别和富集分离，所制备的抗菌肽药物的抑菌效果较强。
主权项：1.一种黑水虻富抗菌肽药物提取纯化方法，其特征在于：步骤如下：。1分别称取定量的胰蛋白酶和碱性蛋白酶溶于特定溶剂中制成复合酶溶液，然后称取定量的脱脂黑水虻虫粉加入到复合酶溶液中，室温下超声辅助酶解，超声强度为20-80kHz，超声时间为2-6h，即得到黑水虻粗提物。2将步骤1中得到的酶解液加入到自交联囊泡双水相体系中，室温下机械搅拌待两相变得清晰透明后，通过离心方式实现相分离，收集双水相洗液并冷冻干燥制得抗菌肽粗品A。3将独特分子印迹聚合物MIPs作为填料装入反相柱中，然后将步骤2中制得的抗菌肽粗品A加入到浓度为0.05-0.1wt.％三氟乙酸中，配成浓度为1-5mgmL的多肽溶液，再与磷酸盐溶液PBS进行反相柱平衡处理。采用磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集馏分进行二次上样和二次洗脱，最终收集馏分冷冻干燥，即可制得高抗菌肽药物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 武汉工程大学 一种黑水虻富抗菌肽药物提取纯化方法
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