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一种原核细菌基因组连续随机转座整合系统的构建 

申请/专利权人:江南大学

申请日:2024-03-04

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN118291495A

主分类号:C12N15/54

分类号:C12N15/54;C12N15/70;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/125

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开

摘要:本发明公开了一种原核细菌基因组连续随机转座整合系统的构建,属于生物工程技术领域。该系统利用Mariner家族转座子,由单质粒或双质粒实现转座功能,通过诱导型启动子控制转座酶的表达,使得该系统的转座过程受到诱导剂调控,可将特定DNA序列随机整合至宿主的基因组中,并通过随机引物PCR鉴定插入位点。该系统可用于实现外源蛋白在原核细菌基因组中的整合表达,结合高通量筛选技术,在原核细菌功能基因的挖掘以及基因随机敲除文库构建等方面有着应用前景。

主权项:1.一种转座子系统,其特征在于,所述转座子系统包括:1用于编码转座酶的多核苷酸片段,所述多核苷酸片段含有核苷酸序列如SEQIDNO.5所示的转座酶编码基因himar1C9;2提供待插入目的基因的载体,所述载体含有:连接于目的基因两端的末端反向重复序列ITRs-1和ITRs-2;所述末端反向重复序列ITRs-1和ITRs-2反向互补;所述ITRs-1或ITRs-2的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示;能够在大肠杆菌或枯草芽孢杆菌内启动复制的复制起始区。

全文数据:

权利要求:

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