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申请/专利权人：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心(广西壮族自治区屠宰技术中心)
摘要：本发明公开了一种用于PHEV、PRV和CSFV检测的多重数字PCR试剂盒及其方法，所述的试剂盒包括了如序列表中序列1～9所示的引物和探针；取猪的组织样品加入PBS缓冲液后研磨、离心得到上清液；取上清液提取得到总核酸并将其作为模板与上述引物和探针混合配制反应体系，接着将反应体系添加到芯片的样品孔中，接着将芯片放入NaicaTM自动液滴芯片数字PCR系统中完成cdRT‑PCR反应；反应结束后，将芯片转移到Prism3液滴读取和分析仪中进行三色荧光成像，获取FAM（蓝色）、VIC（绿色）和Cy5（红色）检测通道的图像，然后在CrystalReader采集和数据分析软件中分析扩增图像的结果。本发明具有特异性好、灵敏度高的优点，能够同时检测PHEV、PRV和CSFV，为实验室鉴别检测三种病毒提供了有效的技术手段。
主权项：1.一种用于PHEV、PRV和CSFV检测的多重数字PCR试剂盒，其特征在于：所述的多重数字PCR试剂盒包括引物组合A、探针A、引物组合B、探针B、引物组合C、探针C；所述引物组合A包括以下引物：引物FA:CCAGAAGGATGTTTATGAATTGC；引物RA:CCTGATGTTGATAGGCATTCA；所述探针A为:FAM-TGGCGCGATTAGATTTGAYAGCACACTC-BHQ1；所述引物组合B包括以下引物：引物FB:ACGACAACGAGCTCCTCATCT；引物RB:CTGATCGTCTCGGGCACCT；所述探针B为:VIC-TCATCGAGCCCTGCACCGGCAACCA-BHQ1；所述引物组合C包括以下引物：引物FC:GAGGGACTAGCCGTRGTGG；引物RC:CCTCGTCCACRTAGCATCTCG；所述探针C为:CY5-AGCTCCCTGGGTGGTCTAAGTCCTGAGT-BHQ2。
全文数据：
权利要求：
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