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申请/专利权人：西北工业大学
申请日：2024-04-19
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118258991A
主分类号：G01N33/531
分类号：G01N33/531;G01N33/543;G01N33/569
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本发明提供了一种Apt‑S‑S‑rMGO外泌体捕获免疫磁珠的制备方法及利用其提取外泌体的方法，解决现有外泌体分离方法所存在的成本高、步骤繁琐、耗时长、得率低以及纯度低的不足之处。本发明先将羧基化磁性氧化石墨烯通过酰胺化反应结合胱胺二盐酸盐，再通过酰胺化反应结合羧基化适配体，构建Apt‑S‑S‑rMGO外泌体捕获免疫磁珠。该免疫磁珠通过其上适配体Apt与外泌体特有的表面CD63蛋白进行碱基互补配对，顺利捕获外泌体；如此不仅能够获得形态完整、纯度高的外泌体，还可通过二硫键在紫外照射下光解的原理，对外泌体进行高效洗脱分离；整个提取过程不影响外泌体的生物活性，有利于外泌体的下游应用。
主权项：1.一种外泌体捕获免疫磁珠Apt-S-S-rMGO的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1制备羧基化磁珠将磁性氧化石墨烯在水中分散均匀，之后加入氢氧化钠和氯乙酸进行超声波浴反应，反应结束后磁吸洗涤，得到羧基化磁珠；2制备结合胱胺二盐酸盐的磁珠2.1在步骤1得到的羧基化磁珠中加入1-乙基-3-二甲基氨基丙基碳酰二亚胺EDC活化羧基；2.2向步骤2.1的溶液中加入N-羟基丁二酰亚胺NHS和胱胺二盐酸盐，在常温下进行酰胺化反应；2.3反应结束后，磁吸洗涤，得到结合胱胺二盐酸盐的磁珠；3制备外泌体捕获免疫磁珠向羧基活化后的羧基化靶标外泌体CD63蛋白的适配体中加入步骤2得到的结合胱胺二盐酸盐的磁珠以及N-羟基丁二酰亚胺NHS进行酰胺化反应，反应结束后，磁吸洗涤并真空干燥，即得到外泌体捕获免疫磁珠。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西北工业大学 一种Apt-S-S-rMGO外泌体捕获免疫磁珠的制备方法及利用其提取外泌体的方法
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