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一种基于分支杂交链式反应的真菌毒素检测方法 

申请/专利权人:南通大学

申请日:2024-03-22

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256599A

主分类号:C12Q1/682

分类号:C12Q1/682;G01N33/53;G01N33/543

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明提供一种基于分支杂交链式反应的真菌毒素检测方法,首次提出将bHCR与LFA相结合的新型真菌毒素检测平台,使用特定的适配体与真菌毒素结合,触发引发链的释放,进而促使bHCR扩增生成三维树突状DNA纳米结构,并通过功能化量子点的集成实现信号进一步放大。该方法避免了酶催化过程,试纸条无需制备和纯化抗体和或半抗原,从而降低了测试费用并简化了操作程序,检测结果简单直观,检测灵敏度与商业胶体金相比可提高2到3个数量级。此外,通过替换适配体和核酸序列可以有效地扩大检测靶点范围,使其成为适用于各种分析方案的通用技术,在公共卫生、农业和环境监测等多个领域具备潜在的应用前景。

主权项:1.一种基于分支杂交链式反应的真菌毒素检测方法,其特征在于,包括如下步骤:将真菌霉素适配体与引发链杂交形成双链AI;向真菌霉素中加入双链AI,触发引发链的释放;根据引发链设计发卡结构探针和捕获探针;所述发卡结构探针能够与引发链发生分支杂交链式反应,且反应生成的双链的Tm值大于发卡结构探针本身的Tm值;所述捕获探针能够与引发链的特定片段特异性互补;向待测样品中加入双链AI,触发引发链的释放,向所得产物中加入所述发卡结构探针,发生分支杂交链式反应;利用所述捕获探针捕获分支杂交链式反应所得产物,并加入信号标签,产生荧光信号;根据荧光信号对待测样品中真菌霉素进行定性和定量诊断。

全文数据:

权利要求:

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