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申请/专利权人：上海上药第一生化药业有限公司
摘要：本发明公开了一种提高PCR鉴定蛋白类生化原料粗品中猪牛羊源成分灵敏度的方法。所述方法包括：1PCR扩增待检测猪牛羊基因组DNA样品；2将步骤1所得PCR产物进行100倍稀释；3PCR扩增步骤2所得稀释后的PCR产物；4检测步骤3所得PCR产物。使用该方法可以提高PCR鉴定蛋白类生化原料粗品中猪牛羊源成分灵敏度并避免在一次PCR过程中因反应循环数太多而产生非特异性条带的问题。该方法具有检测灵敏度高、操作简单、成本低的优势，能鉴别出蛋白类生化原料粗品中的痕量DNA的种属来源。
主权项：1.一种提高PCR鉴定蛋白类生化原料粗品中猪牛羊源成分灵敏度的方法，其特征在于，其包括以下步骤：1PCR扩增待检测猪牛羊基因组DNA样品；2将步骤1所得PCR产物进行100倍稀释；3PCR扩增步骤2所得稀释后的PCR产物；4检测步骤3所得PCR产物，其中步骤1和步骤3所述PCR扩增中所使用引物为：针对猪源样品检测的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；针对牛源样品检测的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；针对羊源样品检测的正向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示，反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示；步骤1中所述PCR扩增的反应程序为：194℃预变性3min；294℃变性30s；357℃退火30s；472℃延伸50s；5步骤2-4循环30次；672℃延伸10min；74℃终止；步骤3中所述PCR扩增的反应程序为:194℃预变性3min；294℃变性30s；357℃退火30s；472℃延伸50s；5步骤2-4循环30次；672℃延伸10min；74℃终止。
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