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申请/专利权人:扬州大学
摘要:本发明公开了一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法。该方法采用含有特定目标基因片段的pTRV2载体与pTRV1载体分别转化到农杆菌感受态中,并将含有这两种载体的单克隆菌体混合,利用侵染液重悬得到混合侵染液,切除银杏播种苗上胚轴并浇灌菌液,实现对银杏目标基因的沉默。本发明建立的银杏的pTRV‑VIGS病毒诱导基因沉默的方法下调银杏内源的目标基因的相对表达量,具有简单快速、高通量、易于操作的优势,为以后开展银杏基因功能研究提供了一种新途径和技术支持。
主权项:1.一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法,其特征在于,包括如下步骤:1将pTRV1载体和含有银杏特定目的基因片段的pTRV2载体分别转化到农杆菌感受态中,筛选得到含有pTRV1的农杆菌和含有pTRV2-目的基因的农杆菌;2将含有pTRV1的农杆菌和含有pTRV2-目的基因的农杆菌分别进行增殖培养得到含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体液;3将含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体液分别离心,利用重悬液分别重悬上述两含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体,将含有pTRV1的农杆菌的单克隆菌体重悬液和含有pTRV2-目的基因的农杆菌的单克隆菌体重悬液混匀,静置,得到目的基因的侵染液;4将侵染液浇灌银杏进行侵染,实现对银杏特定目标基因的沉默。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 扬州大学 一种TRV载体介导病毒诱导银杏基因沉默的方法
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