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申请/专利权人：苏州谱佳新材料科技有限公司;山东复泛科技发展有限公司

摘要：本发明公开了一种基于SA‑biotin的C反应蛋白免疫比浊标记方法，属于生物检测技术领域。本发明公开的一种基于SA‑biotin的C反应蛋白免疫比浊标记方法，包括SA球的制备、biotin‑抗体的制备、SA‑biotin标记。本发明方法采用生物素和链霉亲和素分别标记微球和抗体，理论上1个链霉亲和素可结合4个生物素，扩大了信号，提高灵敏度；此外排除了羧基活化的不确定性问题，抗体标记在微球的过程无需前处理，简化生产时间。

主权项：1.一种基于SA-biotin的C反应蛋白免疫比浊标记方法，其特征在于，包括以下步骤：1SA球的制备1从冰箱中取出分装好的EDC与SA，平衡至室温；2取固含量为10％的乳胶微球1ml，加入50mMpH6.0MES缓冲液使乳胶微球终固含量为1％；3离心，去上清，加入1ml50mMpH6.0MES缓冲液，超声分散；4向溶液中加入100-200μl5mgmlSA，旋转混匀，获得乳胶微球溶液；5将10-100μl20mgml平衡至室温的EDC，逐滴加入混匀的乳胶微球溶液中，旋转混匀；6离心，去上清，加入1ml50mMpH6.0MES缓冲液，超声分散；7加入封闭液1ml，封闭；8离心，去上清，向管中加入50mMpH6.0MES缓冲液，超声分散，获得SA球；2biotin-抗体的制备1取出biotin和PBS缓冲液平衡至室温；2用PBS缓冲液将鼠抗人CRP单克隆抗体稀释至1mgml，涡旋混匀，获得抗体溶液；3将biotin用PBS缓冲液稀释至1mgml，获得biotin溶液；4向抗体溶液中加入biotin溶液；所述抗体溶液与所述biotin溶液的用量体积比为10：1；5迅速混匀，室温混匀，获得biotin-抗体；3SA-biotin标记1取出标记好的SA球，超声功率为20％，超声10s，获得超声后的SA球；2将biotin-抗体与超声后的SA球混合，旋转混匀2h；所述超声后的SA球与所述biotin-抗体的用量体积比为10：1；3离心，去上清；4加入复溶液，吹打分散。

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