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申请/专利权人：福州大学;清源创新实验室
摘要：本发明提供一种大肠杆菌T7表达系统的半安慰诱导方法，实现大肠杆菌以葡萄糖为主要碳源，并利用乳糖及其代谢产物为有效诱导物的基因线路。该方法以野生型E.coliBL21DE3为宿主，借助组成型启动子pdc过表达非特异性糖转运通道基因secYΔP,secE,secG,sCVE和乳糖异构酶基因lacZ，构建不受葡萄糖CCR效应影响的乳糖转运及分解途径；随后，利用葡萄糖CCR效应遏制半乳糖激酶基因galk表达，阻断半乳糖磷酸化的下游代谢途径，形成诱导物半乳糖的稳定积累；最后，通过检测T7启动子控制下绿色荧光蛋白GFP的荧光强度，实现对该系统中乳糖及其代谢产物诱导效果的验证。
主权项：1.一种大肠杆菌T7表达系统的半安慰诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：通过组成型启动子pdc过表达secYΔp,secE,secG,sCVE,lacZ，为大肠杆菌构建不受葡萄糖CCR效应影响的乳糖转运、分解途径，实现葡萄糖乳糖共利用；同时，利用葡萄糖CCR效应遏制半乳糖激酶基因galk表达，阻断半乳糖磷酸化的下游代谢途径，形成诱导物半乳糖的稳定积累，进而实现半安慰型诱导；最后，通过检测T7启动子控制下绿色荧光蛋白GFP的荧光强度，实现对该系统诱导效果的验证。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 福州大学 清源创新实验室 一种大肠杆菌T7表达系统的半安慰诱导方法
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