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申请/专利权人：河南大学
摘要：本申请属于动物实验技术领域，具体涉及一种动物实验中脑组织单细胞分离制备方法。该方法包括：获得实验动物脑组织并进行预处理、酶解处理、制备单细胞悬液等步骤。本申请中，发明人以小鼠脑组织为例，通过对不同生物酶类型组合、生物酶用量比例的优化探索，获得了一种操作较为便捷、分离高效且细胞活性较好的脑组织单细胞分离制备方法，该方法对脑组织解离消化较为彻底，反应条件温和，对脑组织细胞损伤较低，细胞活率较高，可为原代组织细胞培养、流式细胞术检测、单细胞测序等实验操作奠定良好的技术基础，具有较好的技术实用价值。
主权项：1.一种动物实验中脑组织单细胞分离制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（一）获得实验动物脑组织并进行预处理将实验动物处死后，立即对脑组织取样，并对所得脑组织样品进行清洗以去除脑组织表面残留杂物；清洗干净后，进一步去除脑组织外脑膜；外脑膜去除干净后，将脑组织切碎至肉糜状；（二）酶解处理将步骤（一）中切碎后实验动物脑组织置于酶解液中，充分混匀后，37℃酶解处理20~90min；酶解处理结束后，将酶解后脑组织液过细胞滤网，收集滤液；所述酶解液，为添加有100~1000Uml的CollagenaseType1、100~1000Uml的CollagenaseType2、2~4Uml的DispaseⅡ、25~200Uml的DNaseⅠ、300~700Uml的PapainPapaya的溶液；（三）制备单细胞悬液将步骤（二）所收集滤液，离心，弃上清，将沉淀重悬后即为脑组织单细胞悬液。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 河南大学 一种动物实验中脑组织单细胞分离制备方法
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