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申请/专利权人：大连工业大学

摘要：本发明公开了一种Fe3O4@PMMAPAMAM微球及其合成与应用，采用共沉淀法制备了油酸修饰的Fe3O4，再通过悬浮聚合法合成了聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球，使用发散合成法合成了Fe3O4@PMMAPAMAM微球。然后使用戊二醛作为交联剂，将Fe3O4@PMMAPAMAM微球应用于脂肪酶的固定化。与游离脂肪酶相比，Fe3O4@PMMAPAMAM微球固定化脂肪酶能在更大的反应温度和反应pH值范围内保留较高的酶活且其具有优秀的热稳定性和pH稳定性，其对底物的亲和力也比游离脂肪酶更强。此外，Fe3O4@PMMAPAMAM微球固定化脂肪酶还有着优秀的酶活和载酶量以及优异的重复使用性和储存稳定性。

主权项：1.一种Fe3O4@PMMAPAMAM微球的合成方法，其特征在于：首先采用共沉淀法制备了油酸修饰的Fe3O4，再以油酸修饰的Fe3O4为原料通过悬浮聚合法合成了聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球，再以聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球为原料使用发散合成法合成了Fe3O4@PMMAPAMAM微球，即聚酰胺-胺树枝状大分子接枝的聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球；具体过程包括以下步骤：（一）、油酸修饰的Fe3O4的制备：将2-5gFeCl2·4H2O和4-7gFeCl3加入容器中，再向其中加入180-220mL去离子水并在氮气保护下搅拌排除反应体系内溶解的氧气后，加热至80-90°C，然后向反应体系中倒入18-22mL氨的质量浓度23-27%NH3·H2O，并恒温反应3-7分钟后，并向其中滴加6-9mL油酸，再恒温反应25-35分钟后，将产物冷却至室温，固液分离收集固体产物，并用去离子水洗涤固体产物，干燥后即可获得油酸修饰的Fe3O4；（二）、聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球的合成：将5-8g聚乙烯醇1788和230-270mL去离子水加入容器中，将混合物在磁力搅拌的条件下加热至85-95°C，然后加入5-8gNaCl，完全溶解后，得水相；将1-5g油酸修饰的Fe3O4、22-26mL甲基丙烯酸甲酯、1-4mL二乙烯苯和0.5-1.5g过氧化苯甲酰加入容器中，将混合物在室温下搅拌混合均匀后，得油相；将油相和水相在容器中混合并在氮气保护下搅拌排除反应体系内溶解的氧气后，开始加热至75-85°C，恒温反应8-12小时，反应完成后，将产物冷却至室温，固液分离收集固体产物，并用去离子水和乙醇依次洗涤固体产物，干燥后即可获得聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球；（三）、Fe3O4@PMMAPAMAM微球的合成：（1）酰胺化反应：将作为原料的6-9g聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球、130-170mLN,N-二甲基甲酰胺和60-90mL乙二胺加入容器中并在氮气保护下搅拌排除反应体系内溶解的氧气后，开始加热至75-85°C，恒温反应6-10小时，然后将产物冷却至室温，固液分离收集固体产物，再用去离子水和乙醇依次洗涤固体产物，干燥后获得的氨化的磁性聚合物微球，命名为G-0；（2）迈克尔加成反应：将作为原料的6-9g经酰胺化反应后获得的磁性聚合物微球G-0、130-170mLN,N-二甲基甲酰胺和45-55mL丙烯酸甲酯加入容器中并在氮气保护下搅拌排除体系内溶解的氧气后，开始加热至75-85°C，恒温反应6-10小时，反应完成后，将产物冷却至室温，固液分离收集固体产物，再用去离子水和乙醇依次洗涤固体产物，干燥；然后将收集的固体代替步骤（1）酰胺化反应中的原料再进行一次步骤（1）酰胺化反应操作，其过程和条件同步骤（1），所得的材料为第一代Fe3O4@PMMAPAMAM微球，称之为G-1；和或，（3）以G-1代替上述步骤（2）的原料G-0重复上述步骤（2）的反应即可制备第二代Fe3O4@PMMAPAMAM微球，即G-2；和或，（4）以G-2代替上述步骤（2）的原料G-0重复上述步骤（2）的反应即可制备第三代Fe3O4@PMMAPAMAM微球，即G-3。

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