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申请/专利权人:武汉爱基百客生物科技有限公司
摘要:本发明涉及分子生物学领域。本发明提供了一种适用于ATAC‑seq的植物叶片提取细胞核的方法,包括步骤:S1.液氮研磨得植物叶片组织粉末;S2.加入复合型细胞壁降解酶试剂对细胞壁进行酶解;S3.配制N种细胞核提取缓冲试剂,N>1,采用差速离心法提取细胞核,每次离心后用所述N种细胞核提取缓冲试剂中的任一种重悬沉淀;S4.Percoll密度梯度离心分离去除杂质。本发明采用了复合型细胞壁降解酶试剂,不同酶在这一过程中展现出协同效应。本发明还提供了更适于差速离心的细胞核提取缓冲试剂的组分,NPB试剂使用CHAPS,不改变蛋白质活性但可裂解细胞膜;HEPES维持细胞核结构的稳定,利于保持细胞核的完整性,减少对后续建库、测序分析结果的影响。
主权项:1.一种适用于ATAC-seq的植物叶片提取细胞核的方法,其特征在于,包括步骤:S1.将植物叶片组织进行液氮研磨得植物叶片组织粉末;S2.取所述植物叶片组织粉末,加入复合型细胞壁降解酶试剂对细胞壁进行酶解,然后细胞筛过滤收集液体;S3.配制N种细胞核提取缓冲试剂,N>1,采用差速离心法提取细胞核,每次离心后用所述N种细胞核提取缓冲试剂中的任一种重悬沉淀;S4.采用Percoll密度梯度离心的方法分离去除杂质,回收细胞核。
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百度查询: 武汉爱基百客生物科技有限公司 一种适用于ATAC-seq的植物叶片提取细胞核的方法及应用
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