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申请/专利权人:南通大学
摘要:本发明属于生物检测技术领域,公开了一种ctDNA检测试剂盒及检测方法。试剂盒包括:用于目标ctDNA进行扩增的试剂,包括第一阶段扩增试剂和第二阶段扩增试剂;信号标记物TPA‑DCPPNPs;保护探针,用于猝灭TPA‑DCPPNPs的ECL信号;硫代捕获探针,用于捕获所述保护探针。检测方法为:将靶标两级扩增后,得到PER产物;制备双链捕获probe@protector探针;将信号标记物TPA‑DCPPNPs滴涂在玻碳电极上,然后修饰AuNPs,再修饰双链捕获probe@protector探针,封闭非特异性活性位点,然后与得到的PER产物共孵育,然后测定ECL信号。本发明检测方法线性检测范围宽且具有较低的检测限。
主权项:1.一种ctDNA检测试剂盒,其特征在于,包括:用于靶标扩增的试剂,所述试剂包括第一阶段扩增试剂和第二阶段扩增试剂;所述第一阶段扩增试剂用于对靶标进行第一阶段扩增;所述第二阶段扩增试剂用于对第一阶段扩增的产物进行进一步扩增;所述第一阶段扩增试剂包括H1和ExoIII;其中,H1为SEQIDNO.1所示序列;所述第二阶段扩增试剂包括H2、dNTP、DNA聚合酶、cleanerG和MgCl2;其中,H2为SEQIDNO.2所示序列;信号标记物TPA-DCPPNPs;保护探针,所述保护探针为BHQ3修饰的SEQIDNO.3所示核酸序列,用于猝灭TPA-DCPPNPs的ECL信号;硫代捕获探针,所述硫代捕获探针为巯基修饰的SEQIDNO.4所示核酸序列,用于捕获所述保护探针;所述检测试剂盒用于ctDNA的检测或辅助鉴定,所述检测或辅助鉴定以非疾病诊断为目的。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南通大学 一种ctDNA检测试剂盒及检测方法
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