买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!
申请/专利权人:江苏省海洋水产研究所
摘要:本发明涉及一种区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的ISSR分子标记方法,包括利用2个ISSR分子标记对黑鲷及2个杂交新品系的个体进行PCR扩增,根据对PCR产物的电泳条带检测,区分来自黑鲷、杂交子代及回交子代等3种鲷鱼的个体。本发明方法操作简便,费用低,准确度高且通用性好,能快速、有效地鉴别基于黑鲷的不同亲本组合所得的杂交种新品系,为黑鲷新品种培育研究和杂交新种质的鉴别研究提供技术帮助。
主权项:1.一种区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的ISSR分子标记方法,包括:(1)分别提取黑鲷、回交及杂交子代3个种质个体的总DNA,4℃以下保存备用;其中,杂交子代为黑鲷♀×真鲷♂反交F1,记作HF1;回交后代为黑鲷♀×HF1,记作BF1;(2)采用ISSR-UBC846、ISSR-UBC847引物对上述总DNA进行PCR扩增;其中,所述ISSR-UBC846的序列为:CACACACACACACACART;所述ISSR-UBC847的序列为:CACACACACACACACARC;所述PCR扩增反应体系为:10pmolL引物1μl,DNA模板1.5μl,Buffer2.5μl,dNTP0.5μl,Mg2+1.5μl,Taq聚合酶0.25μl,添加ddH2O至25μl;所述PCR扩增反应条件为:94℃预变性5min,然后进入循环:94℃45s,56℃45s,72℃45s,共36个循环,最后一个循环结束后再在72℃继续延伸10min,4℃保存;(3)凝胶电泳检测PCR产物的DNA条带情况,其中引物ISSR-UBC847的PCR扩增产物的电泳图谱中,黑鲷个体在750~1000bp间仅有一扩增带,而其它两种鱼的个体无此扩增带;而在引物ISSR-UBC846的PCR扩增产物的电泳图谱中,反交鱼个体无扩增带,其它两种有,据此鉴别出黑鲷、回交或杂交子代的个体。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 江苏省海洋水产研究所 一种利用ISSR分子标记区分黑鲷鱼及其两种杂交子代的方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。