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一种用于检测大豆植物MON87705的核酸检测方法 

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摘要:本发明涉及一种用于检测大豆植物MON87705的核酸检测方法,以双重环介导等温扩增技术、链置换反应、CRISPRCas12a构建侧流层析传感器,根据大豆内参基因Lectin的LAMP产物设计SD反应序列,根据转基因大豆MON87705转化体特异性序列的LAMP产物设计crRNA,利用碱基互补原理与CRISPRCas12a反应的反式切割活性,只需在一次检测流程中分别读取两次LFB的检测结果,即可实现大豆内参基因Lectin与转基因大豆MON87705转化体特异性序列的逻辑化检测。

主权项:1.一种用于检测大豆植物MON87705的LAMP-SD-CRISPR的LFB检测组合,其特征在于,所述LFB检测组合包括双重LAMP引物组、SD长链及短链组合、crRNA和LFB传感器核酸组合;所述双重LAMP引物组为第一引物组或第二引物组:所述第一引物组为LectinF3、LectinB3、LectinFIP、LectinBIP、F31、B31、FIP1和BIP1,分别如SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示;所述第二引物组为LectinF3、LectinB3、LectinFIP、LectinBIP、F34、B34、FIP4和BIP4,分别如SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13和SEQIDNO:14所示;所述SD长链及短链组合中,长链序列为CGACTTATTGAGTTGTAACTTTCCCGA,如SEQIDNO:26所示;短链序列为ACAACTCAATAAGTCG,如SEQIDNO:27所示;所述crRNA选自如下序列之一:UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAGGACAACGGUGCCUUGGCC,如SEQIDNO:23所示;UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCCGGACAUGAAGCCAUUUAC,如SEQIDNO:24所示;所述LFB传感器核酸组合包括T线核酸、C线核酸和金纳米-核酸信号探针;所述T线核酸的序列为TGAGTTGTTTTTTT,如SEQIDNO:29所示;所述C线核酸的序列为TTTTTTATAAGTCG,如SEQIDNO:30所示;所述金纳米-核酸信号探针的序列为CCCCCCCGACTTAT,如SEQIDNO:28所示。

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权利要求:

百度查询: 中国农业大学 一种用于检测大豆植物MON87705的核酸检测方法

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