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申请/专利权人：中山大学中山眼科中心
摘要：本发明公开了一种降低眼压的表达NRP1的重组腺相关病毒的构建方法及其应用。本发明利用AAV为载体携带重组Neuropilin1基因，采用ICAM2血管内皮特异性启动子，构建得到AAV9‑ICAM2‑hNeuropilin1，该AAV9‑ICAM2‑hNeuropilin1作为基因治疗药物，对小鼠进行单次前房注射，可实现AAV载体介导的眼部Neuropilin1基因转导，促进Schlemm’scanal的形成，改善房水外排和降低眼压，可持续时间长且无明显毒副作用，适用于慢性青光眼的治疗。
主权项：1.一种改善房水外排和降低眼压的表达hNeuropilin1的重组腺相关病毒的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1）获取如SEQIDNO.1所示的人源性hNeuropilin1基因片段；2）获取如SEQIDNO.2所示的人源性ICAM2启动子序列；3）构建如SEQIDNO.3所示的ICAM2-hNeuropilin1片段；4）构建pAAV-ICAM2-hNeuropilin1重组质粒；5）AAV9-ICAM2-hNeuropilin1的包装、纯化和浓缩；步骤1）中获取人源性hNeuropilin1基因片段的扩增引物为：hNeuropilin1F:5'-TGGAGACTGCCAGAGATGGAGAGGGGGCTG-3'和hNeuropilin1R:5'-TCATGCCTCCGAATAAGTACTCTGTGTATTC-3'；步骤2）中获取人源性ICAM2启动子序列的扩增引物为：ICAM2F:5'-CCGCGAATTCGAGAAGACTGAATAAGCCGTG-3'和ICAM2R:5'-CAGCCCCCTCTCCATCTCTGGCAGTCTCCA-3'；步骤3）中构建ICAM2-hNeuropilin1片段的扩增引物为：ICAM2-hNeuropilin1F:5'-CCGCGAATTCGAGAAGACTGAATAAGCCGTG-3'和ICAM2-hNeuropilin1R:5'-ATCGGGATCCTCATGCCTCCGAATAAGTAC-3'。
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权利要求：
百度查询： 中山大学中山眼科中心 一种降低眼压的表达NRP1的重组腺相关病毒的构建方法及其应用
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