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申请/专利权人：广州市益豚猪业投资有限公司

摘要：本发明公开了一种对猪流行性腹泻病毒PEDV、猪德尔塔型冠状病毒PDCoV、猪轮状病毒A型RV‑A同时进行三重荧光定量RT‑qPCR检测试剂盒，该试剂盒包括：用于扩增PEDV目标基因片段的引物组、用于检测PEDV的探针；用于扩增PDCoV目标基因片段的引物组、用于检测PDCoV的探针；以及用于扩增RV‑A目标基因片段的引物组、用于检测RV‑A的探针。实验表明，本发明的三重RT‑qPCR试剂的检测灵敏度与单重RT‑qPCR试剂的检测结果无差异，具备高灵敏性、高特异性、低污染和实时检测的优势，可为一线猪场临床腹泻病毒病的预警、早期诊断和防治监测提供可靠的技术和产品。

主权项：1.一种对猪流行性腹泻病毒PEDV、猪德尔塔型冠状病毒PDCoV、猪轮状病毒A型RV-A同时进行三重荧光定量RT-qPCR检测试剂盒，该试剂盒包括：用于扩增PEDV目标基因片段的引物组、用于检测PEDV的探针；用于扩增PDCoV目标基因片段的引物组、用于检测PDCoV的探针；以及用于扩增RV-A目标基因片段的引物组、用于检测RV-A的探针；其中，用于扩增PEDV目标基因片段的引物组和用于检测PEDV的探针为选自于如下设计方案中的至少一种：PEDV方案1：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示；PEDV方案2：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示；PEDV方案3：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:9所示；其中，用于扩增PDCoV目标基因片段的引物组和用于检测PDCoV的探针为选自于如下设计方案中的至少一种：PDCoV方案1：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:10所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:11所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:12所示；PDCoV方案2：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:13所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:14所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:15所示；PDCoV方案3：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:16所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:17所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:18所示；其中，用于扩增RV-A目标基因片段的引物组和用于检测RV-A的探针为选自于如下设计方案中的至少一种：RV-A方案1：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:19所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:20所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:21所示；RV-A方案2：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:22所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:23所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:24所示；RV-A方案3：上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:25所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:26所示，探针的核苷酸序列如SEQIDNO:27所示。

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