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申请/专利权人：安徽师范大学
摘要：本发明涉及植物基因工程技术，公开了一种乌饭树实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法。该筛选方法包括以下步骤：1利用乌饭树转录组测序数据，挑选N个乌饭树候选内参基因，以挑选的N个乌饭树候选内参基因为模板，分别设计实时荧光定量PCR的内参基因引物对，其中N≥2；2以乌饭树组织的RNA反转录获得的cDNA为模板，以内参基因引物对为反应引物对，进行实时荧光定量PCR分析；3将实时荧光定量PCR得到的数据导入GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件进行分析，筛选出最优内参基因和或内参基因组合。本发明通过分析各候选内参基因的表达变化，筛选出相对稳定的基因作为内参基因，有助于在乌饭树基因表达研究中获得可靠的标准化qRT‑PCR数据。
主权项：1.一种乌饭树实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）利用乌饭树转录组测序数据，挑选10个乌饭树候选内参基因，以挑选的10个所述乌饭树候选内参基因为模板，分别设计实时荧光定量PCR的内参基因引物对；（2）以乌饭树组织的RNA反转录获得的cDNA为模板，以所述内参基因引物对为反应引物对，进行实时荧光定量PCR分析；（3）将所述实时荧光定量PCR得到的数据导入GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件进行分析，筛选出最优内参基因和或内参基因组合；其中，步骤（1）中所述乌饭树候选内参基因为肌动蛋白1、肌动蛋白2、肌动蛋白3、肌动蛋白4、肌动蛋白5、核糖体蛋白、泛素结合酶、泛素蛋白基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和腺苷酸激酶，所述肌动蛋白1、肌动蛋白2、肌动蛋白3、肌动蛋白4、肌动蛋白5、核糖体蛋白、泛素结合酶、泛素蛋白基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和腺苷酸激酶的核苷酸序列依次如SEQIDNO.1-SEQIDNO.10所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 安徽师范大学 一种乌饭树实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法
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