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申请/专利权人：上海海洋大学
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种蒙古鲌胚胎冷冻保存的方法，1蒙古鲌胚胎先后在平衡液一和平衡液二中，分别平衡8‑12min；将冷冻保护剂与稀释液按1：1.8‑2.4体积比混合配制平衡液一；将冷冻保护剂与稀释液按1.8‑2.4:1体积比混合配制平衡液二；2蒙古鲌胚胎转移至冷冻保护剂中，收集单个蒙古鲌胚胎，置于液氮冷却的金属块上8‑12s，放于冻存容器内并封口，保存于液氮中。本方法减少了细胞损伤，提高了冷冻保存的效果，胚胎孵化率高；采用固体表面玻璃化法，以液滴的形式保存单个胚胎，流程更加精细化，确保每颗胚胎的升降温过程都能做到温度变化均一，提高蒙古鲌胚胎保存效果和保存方案的可重复性。
主权项：1.一种蒙古鲌胚胎冷冻保存的方法，其特征在于，包括如下步骤：1蒙古鲌胚胎先后在平衡液一和平衡液二中，分别平衡8-12min；将冷冻保护剂与稀释液按1：1.8-2.4体积比混合配制平衡液一；将冷冻保护剂与稀释液按1.8-2.4:1体积比混合配制平衡液二；所述稀释液以水作为溶剂，含有6-10gL氯化钠、0.3-0.7gL氯化钾、12-18gL葡萄糖；所述冷冻保护剂含有体积分数8％-15％甲醇、体积分数10％-20％丙二醇、体积分数10％-20％二甲基亚砜，并含有3.5-5.0gL氯化钠、0.2-0.4gL氯化钾、7-11gL葡萄糖、0.5-1.5mmolL褪黑素和0.5-1.5mgLFe3O4磁性纳米微球；2蒙古鲌胚胎转移至冷冻保护剂中，收集单个蒙古鲌胚胎，置于液氮冷却的金属块上8-12s，放于冻存容器内并封口，保存于液氮中。
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