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一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体及其应用 

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申请/专利权人:中国科学院精密测量科学与技术创新研究院

摘要:本发明公开了一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体及其应用。所述rAAV载体ITR核心表达元件由广谱强启动子CMV、IgG1重链分泌信号肽序列、IgG1重链编码区、连接多肽编码序列、IgG1轻链分泌信号肽序列、IgG1轻链编码区和人血清白蛋白多聚腺苷酸序列构成。通过上述rAAV载体上的酶切位点可以方便快速地对重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)进行操作。利用包装获得的抗体IgG1‑rAAV病毒感染体外培养的HEK293T细胞或C57小鼠等,能够表达具有不同抗原识别活性的各种抗体IgG1。

主权项:1.一种表达抗体IgG1的rAAV载体的构建方法,其特征在于,构建pAAV-ITR-CMV-CH-Linker-CL-HGHpA骨架载体质粒,其序列如SEQIDNO.7所示;在CMV启动子与重链保守区编码序列CH之间通过BamH1和Nhe1酶切位点插入IgG1重链分泌信号肽与重链可变区,在连接多肽编码序列linker与轻链保守区编码序列CL之间通过BmgB1和BsiW1酶切位点插入IgG1轻链分泌信号肽与轻链可变区VL,所述的IgG1重链分泌信号肽序列如SEQIDNO.2所示,所述的IgG1轻链分泌信号肽序列如SEQIDNO.3所示。

全文数据:

权利要求:

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