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申请/专利权人：锦州医科大学

摘要：一种RPA‑侧流层析技术双重检测小鼠细小病毒MVM株和MPV株的引物、探针及试剂盒，试剂盒包括：应用于RPA扩增技术小鼠细小病毒MVM株NS1基因序列的上游引物、中间探针与下游引物和或细小病毒MPV株VP2基因序列的上游引物、中间探针与下游引物，重组酶聚合酶扩增技术所需常规试剂以及测流层析试纸条，所述测流层析试纸条包括加样垫、对照C线、1号检测线和或2号检测线，通过对照线、检测线与引物及探针标记的配合，使用该试剂盒能够快速、灵敏、特异地、在非实验室环境下也可以现场检测检测样本中小鼠细小病毒MVM株NS1基因和或MPV株VP2基因。

主权项：1.一种RPA-侧流层析双重检测小鼠细小病毒MVM株和MPV株的引物对和探针组合，其特征是：具体为检测小鼠细小病毒MVM株NS1基因和或细小病毒MPV株VP2基因的引物对和探针；其中：小鼠细小病毒MVM株NS1基因的正向引物序列是：5’-GAACTATGCACTAACTCCACTTGCATC-3’；小鼠细小病毒MVM株NS1基因的反向引物序列是：5’-Dig-CTCTCAAATCCTCCTCGATCTCTGAC-3’；小鼠细小病毒MVM株NS1基因的探针序列是：5’-FAM-GCACTGCAGAAACCCAGAACACTGGGGAAGCTGTHFTTCCAAAGCCTGCCAA-C3spacer-3’；小鼠细小病毒MPV株VP1基因的正向引物序列是：5’-CCTAAGATACACATATGACAAACAACATGG-3’；小鼠细小病毒MPV株VP1基因的反向引物序列是：5’-Biotin-TTAGTGGTCCATAGCTGTTAAATACATTCT-3’；小鼠细小病毒MPV株VP1基因的探针序列包含是：5’-FAM-CTATGATTCAGGCAGATGGGCTGACAGATGCTTTTHFTTAATGCAACACCATTT-C3spacer-3’；所述小鼠细小病毒MVM株NS1基因的探针，其序列5’端连接有第一标记分子，序列3’端连接有防止聚合反应的保护标签C3-spacer，序列3’端和序列5’端由能够被具有DNA损伤修复活性的酶识别并切除的人工碱基类似物四氢呋喃连接；所述小鼠细小病毒MPV株VP2基因的探针，其序列5’端连接有第一标记分子荧光基团FAM，序列3’端连接有防止聚合反应的保护标签，序列3’端和序列5’端由能够被具有DNA损伤修复活性的酶识别并切除的人工碱基类似物连接；所述小鼠细小病毒MVM株NS1基因的反向引物5’端连接有第二标记分子地高辛；所述小鼠细小病毒MPV株VP2基因的反向引物5’端连接有第三标记分子生物素。

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