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申请/专利权人：河南省农业科学院园艺研究所
摘要：本发明公开了一种杜梨再生与组培苗液体生根体系的建立方法：取一年生带芽枝条，剪去叶片后将茎段截成含腋芽的茎段，消毒后接种于启动培养基上，暗培养7‑15d后，光照培养；将新萌发的嫩芽沿基部切下，转入增殖培养基增殖培养20‑30d后，转入壮苗培养基壮苗培养，取壮苗培养15‑25d的组培苗，挑选新展开幼嫩、厚实叶片为外植体，划断叶中脉至一侧叶缘；将叶片远轴面朝上，置于脱分化培养基上暗培养；经再分化培养、再生芽增殖与壮苗培养、液体生根培养及移栽，即得。该方法可应用于杜梨无菌苗快繁、工厂化育苗、根癌农杆菌介导的遗传转化技术、基因编辑技术等。
主权项：1.一种杜梨再生与组培苗液体生根体系的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：1）组培苗的获得：取一年生带芽枝条，剪去叶片后将枝条剪成含腋芽的茎段，消毒后，将茎段截成带2-3个腋芽的茎段，接种于启动培养基上，暗培养7-15d后，光照培养；2）组培苗的获得：待步骤1）光照培养过程中新生的腋芽长至1-3cm时沿基部切下，转入增殖培养基增殖培养20-30d后，转入壮苗培养基壮苗培养15-25d，备用；3）外植体的获得：取壮苗培养15-25d的壮苗培养组培苗，挑选新展开幼嫩、厚实叶片为外植体，用解剖刀垂直叶中脉切断至一侧叶缘，备用；4）脱分化培养：将叶片远轴面朝上，置于脱分化培养基上暗培养；5）再分化培养：脱分化培养20-30d后，转入再分化培养基中10-20μmol·m2·s-1弱光培养10-15d，后转入20-40μmol·m2·s-1正常光培养至产生再生芽；6）再生芽增殖与壮苗：待再生芽长至1-2cm时，沿茎基部切下，置于增殖培养基培养20±2d后，转入壮苗培养基培养；7）液体生根：切取壮苗培养20-30d的无菌苗，置于生根培养液中暗培养3-4d后，转湿润蛭石中覆膜培养7-10d后，揭膜培养；8）移栽：将生根苗转入草炭土培养。
全文数据：
权利要求：
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