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pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法及其应用 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明公开了一种pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法及其应用。仔猪小肠样品分离得到基因组DNA,并利用PCR技术扩增pBD1启动子片段,序列如SEQIDNO.1所示,将pBD1启动子片段克隆到pGL4.21荧光报告载体中得到pBD1荧光报告质粒,进行酶切线性化后转染猪肠上皮细胞,从而筛选获得阳性细胞系。本发明提供的筛选细胞系的应用,一次可最多检测数十种营养物质对pBD1基因的调控作用,本发明所公开的方法创新性地利用酶切线性化质粒载体转染细胞,构建了一种可长期稳定表达pBD1基因的筛选细胞系,极大地提高了营养物质的筛选效率,可克服现有方法中细胞因生长状态、不同检测方法等因素造成的干扰,有利于开发具有pBD1基因调控功能的营养物质及其后续应用生产。

主权项:1.一种pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法,其特征在于,仔猪小肠样品分离得到基因组DNA,并利用PCR技术扩增pBD1启动子片段,序列如SEQIDNO.1所示,将pBD1启动子片段克隆到pGL4.21荧光报告载体中得到pBD1荧光报告质粒,进行酶切线性化后转染猪肠上皮细胞,从而筛选获得阳性细胞系。

全文数据:

权利要求:

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