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AroG的突变体及其在产氨基酸基因工程菌中的应用 

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申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所

摘要:本发明公开了一种3‑脱氧‑α‑阿拉伯庚酮糖酸‑7‑磷酸合酶AroG的突变体和调控因子RpoS的失活在产色氨酸菌株的构建中的应用。利用本发明获得的基因工程菌进行发酵,可以获得L‑色氨酸的有效积累,能够明显提高其产量,具有产业化应用价值。

主权项:1.一种产色氨酸的基因工程细菌的制备方法,其特征在于,是通过定点突变将出发细菌中3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶AroG进行突变,以解除苯丙氨酸对AroG的抑制作用,其是通过构建含有编码所述突变的aroG基因的表达载体导入出发细菌中,或者通过基因定点突变将出发细菌中的AroG编码基因进行所述突变;同时,将出发细菌中的调控因子RpoS进行失活,还通过基因工程方法使所述出发细菌过表达ppsA基因、敲除trpR基因和敲除色氨酸酶tnaA基因,最终得到产色氨酸的基因工程细菌;所述3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶AroG的突变是指将AroG的第211位氨基酸残基由S突变成F;所述对调控因子RpoS进行失活,其是通过基因编辑方法实现,其是将其中氨基酸序列第33位进行无义突变;其中,aroG基因的GenBank登录号为945605,rpoS基因的GenBank登录号为947210,ppsA基因的GenBank登录号为946209,trpR基因的GenBank登录号为948917,tnaA基因的GenBank登录号为948221;所述基因工程细菌的出发细菌是大肠杆菌KW。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国科学院天津工业生物技术研究所 AroG的突变体及其在产氨基酸基因工程菌中的应用

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