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申请/专利权人：南通大学
摘要：本发明公开了一种Cabs1蛋白抗体及其制备方法和应用，属于生物技术检测领域。针对目前商业化的Cabs1抗体均不能识别和检测小鼠Cabs1蛋白的表达，限制了利用小鼠模型研究Cabs1蛋白的功能与机制，本发明提供了一种可以用于Cabs1蛋白检测的多克隆抗体，其可以应用与WesternBlot，免疫荧光，免疫共沉淀等多种用途，特异性高。
主权项：1.Cabs1蛋白抗体，其特征在于：采用以下步骤制备得到：步骤1，Cabs1编码序列的优化：利用密码子的简并性和偏好性原则，在保证翻译后的蛋白序列不变的前提下对Cabs1的编码序列进行优化，以利于蛋白的成功表达，优化后的Cabs1编码序列如SEQIDNO.1所示；步骤2，原核表达载体的构建：用NdeI和HidII内切酶对原核表达载体PET-30a+进行双酶切备用，在优化后的Cabs1编码序列上加入酶切位点和多聚组氨酸标签，然后与载体连接，转化BL21DE3大肠杆菌，选取阳性菌株用于诱导Cabs1蛋白的表达；步骤3，Cabs1蛋白的诱导表达与纯化：用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导Cabs1蛋白的表达，然后在37℃条件下扩大培养，培养12h后收集细菌，提取蛋白，利用镍柱纯化目标蛋白，所述Cabs1蛋白的序列如SEQIDNO.2所示；步骤4，Cabs1抗体的制备：将Cabs1抗原蛋白与免疫佐剂一起免疫新西兰大白兔，经过三次加强免疫后，采集血清，对抗血清进行抗原抗体亲和纯化，得到Cabs1蛋白抗体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南通大学 一种Cabs1蛋白抗体及其制备方法和应用
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