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申请/专利权人:贵州省烟草公司遵义市公司;长江大学
申请日:2021-03-29
公开(公告)日:2021-06-15
公开(公告)号:CN112961851A
专利技术分类:..分离、制备或纯化DNA或RNA的方法(DNA或RNA的化学制备入C07H21/00;自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34)[2006.01]
专利摘要:本发明涉及一种生物体或组织中dsRNA及提取该dsRNA的方法。该方法包括预处理、离心获取上清液的步骤,将上清液进行层析并分段洗脱的步骤,以及收集洗脱液进行后处理的步骤。本发明结合有机试剂处理和纤维素柱层析,先对生物体或组织进行处理,促使其破碎,以释放核酸物质至液相中;再利有纤维素柱层析中填料对液相中浓度核酸物质进行可逆性吸附,通过分段洗脱,能够有效分离dsRNA与其他核酸物质,尤其能够显著降低DNA降解物质的干扰,提高最终产品dsRNA的纯度。
专利权项:1.从生物体或组织中提取dsRNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、获取生物体或组织,粉碎后混入有机试剂进行处理,离心;S2、取离心上清液,混入提取试剂作为上样液上样层析柱,促使上样液中dsRNA可逆性地吸附于层析柱中的填料上;S3、采用第一溶液和第二溶液依次对层析柱中填料进行分段洗脱,得到第一洗脱液和第二洗脱液,收集所述第二洗脱液进行后续处理以得到最终的dsRNA。
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