恭喜安徽大学绿色产业创新研究院罗学才获国家专利权
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龙图腾网恭喜安徽大学绿色产业创新研究院申请的专利一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115925858B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211425815.5,技术领域涉及:C07K14/435;该发明授权一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用是由罗学才;施昊;尹若春设计研发完成,并于2022-11-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用,涉及基因工程、发酵工程与应用生物学领域,所述贻贝蛋白Mfp2‑6前体具有如SEQIDNO.1‑5任一所示的氨基酸序列,所述贻贝蛋白前体表达菌株为酿酒酵母Saccharomycescerevisiae、毕氏酵母Pichia.pastoris、大肠杆菌Escherichiacoli。本发明一种异源表达的贻贝蛋白的制备方法,与其他物理、化学和生物合成技术相比,贻贝蛋白更容易制备,且制备成本低,大规模应用更经济,且整个工艺过程中所添加的酶制剂及加工助剂安全无害。
本发明授权一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用在权利要求书中公布了:1.一种异源表达的贻贝蛋白前体在制备贻贝蛋白中的应用,其特征在于,所述利用异源表达的贻贝蛋白前体制备贻贝蛋白的方法包括工程菌株的构建、贻贝蛋白前体发酵表达与发酵产物的酶法转化纯化;所述贻贝蛋白前体具有如SEQIDNO.1-5任一所示的氨基酸序列,所述贻贝蛋白前体异源表达的菌株为酿酒酵母Saccharomycescerevisiae、毕氏酵母Pichia.pastoris、大肠杆菌Escherichiacoli;制备贻贝蛋白,具体包括以下步骤:1根据贻贝蛋白前体表达菌株的密码子偏好性分别设计如SEQIDNO.1-5所示的贻贝蛋白前体氨基酸序列的编码基因序列,将基因序列连接至PET28a载体上并转入大肠杆菌DH5α中,经过筛选扩培,抽提质粒并进行双酶切验证、回收,获得目的序列,将目的序列连接到蛋白表达载体上,转化受体菌,获得工程菌株;2将所述工程菌株经过活化和扩大化培养后进行发酵表达,发酵结束后,破碎菌体,使用亲和层析柱纯化发酵产物,获得纯化产物;3将所述纯化产物加入复合转化酶体系,进行酶转化,酶转化结束后,使用亲和层析柱,分离纯化转化产物,将纯化产物冷冻干燥,溶于1%柠檬酸溶液中,获得贻贝蛋白;其中,当贻贝蛋白前体异源表达的菌株为酿酒酵母时,复合转化酶为VC氧化酶、葡萄糖氧化酶以及SOD酶,当贻贝蛋白前体异源表达的菌株为毕氏酵母时,复合转化酶为锰过氧化氢酶、SOD酶以及酪氨酸酶,当贻贝蛋白前体异源表达的菌株为大肠杆菌时,复合转化酶为辣根过氧化物酶、锰过氧化氢酶及葡萄糖氧化酶。
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