恭喜内蒙古医科大学贾芳获国家专利权
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龙图腾网恭喜内蒙古医科大学申请的专利一种牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株、构建方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119592489B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510142314.3,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株、构建方法及其应用是由贾芳设计研发完成,并于2025-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株、构建方法及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种牛布鲁氏菌A19△T4SS‑bvfA菌株、构建方法及其应用,涉及微生物技术领域。所述牛布鲁氏菌A19△T4SS‑bvfA菌株,于2024年9月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.46201。本发明制备出的疫苗能够被区分自然感染和疫苗免疫,无抗性残留,菌体不进入宿主细胞,安全性更高。
本发明授权一种牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株、构建方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种牛布鲁氏菌(Brucellaabortus)A19△T4SS-bvfA菌株,其特征在于,所述菌株,于2024年9月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.46201;所述牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株的具体构建方法如下:S1:将bvfA基因上游同源重组序列、下游同源重组序列合成得到打靶序列△bvfA,克隆入pCVD442GS,获得打靶质粒pCVD442GS-△bvfA;S2:将打靶质粒pCVD442GS-△bvfA电转化入工程菌,获得β2155pCVD442GS-△bvfA供体菌;S3:将β2155pCVD442GS-△bvfA供体菌与牛布鲁氏菌A19受体菌接合,筛选庆大霉素抗性克隆,称为A19pCVD442GS-△bvfA;S4:取单个A19pCVD442GS-△bvfA克隆的菌液接种TSA平板进行筛选,通过PCR和测序技术获得牛布鲁氏菌bvfA基因缺失株A19△bvfA;S5:以单基因缺失株A19△bvfA为初始菌株,参照S1~S4方法同时敲除基因virB1~virB12,得到牛布鲁氏菌A19△T4SS-bvfA菌株;所述打靶序列△bvfA的基因序列如SEQIDNO.1所示;所述virB1~virB12的基因序列如SEQIDNO.6所示。
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