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龙图腾网恭喜长白山皇封参业股份有限公司申请的专利一种提高红参皂苷RG3的制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119662764B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510187253.2，技术领域涉及：C12P33/20；该发明授权一种提高红参皂苷RG3的制备方法是由高庆海;李玉胜;马东方设计研发完成，并于2025-02-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高红参皂苷RG3的制备方法在说明书摘要公布了：本发明方法公开一种提高红参皂苷RG3的制备方法，本发明申请涉及制药技术领域，本发明方法通过建立β‑葡萄糖苷酶和α‑L‑阿拉伯糖苷酶的双酶协同催化体系，实现了对C‑20位糖苷键的立体选择性水解，选择性达95%以上；采用经定向筛选的菌株，通过优化发酵条件和添加0.1%人参皂苷Rb1诱导物，使目标酶基因表达量提高2.5倍，酶活性提升50%；通过添加5%甘油和0.1%Tween‑80的复合稳定剂体系，使酶活性半衰期延长1.8倍，并在38‑42℃的温度控制下实现48小时转化率90%以上；采用超滤‑树脂‑结晶的多重分离策略，确保最终产品纯度≥98%，为规模化生产提供了可靠的工艺基础。

本发明授权一种提高红参皂苷RG3的制备方法在权利要求书中公布了：1.一种提高红参皂苷RG3的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1试剂配制：配制0.15-0.25M磷酸盐缓冲液并调节pH至5.2-5.8；称取红参中提取的人参皂苷Rb1Rb2Rc混合物2-4g溶于100mL缓冲液中制成2-4%底物溶液；按照β-葡萄糖苷酶80-100Ug、α-L-阿拉伯糖苷酶40-60Ug、辅助酶系20-30Ug的比例配制酶液；另配制含4-6%甘油和0.05-0.15%Tween-80的稳定剂混合溶液，同时制备基础培养基，每升培养基包含：葡萄糖15-25g、酵母膏3-7g、蛋白胨8-12g、KH2PO41.5-2.5g、MgSO40.3-0.7g，120-122℃灭菌15-20分钟备用；S2菌种培养：菌种活化从-80℃保存的地衣芽孢杆菌开始，首先将其接种于斜面培养基，26-30℃培养45-50小时后挑取单菌落接种于种子培养基中，在26-30℃、160-200rpm条件下培养22-26小时，发酵培养阶段将种子液按4-6%的接种量转入发酵培养基，控制发酵温度26-30℃，搅拌速度160-200rpm，维持溶氧水平在35-65%，发酵22-26小时后添加0.08-0.12%人参皂苷Rb1作为诱导物；S3酶促转化：酶促转化阶段，向发酵液中加入预先配制的底物溶液和稳定剂混合液，将反应温度调节至38-42℃，保持160-200rpm搅拌，转化过程中每1.5-2.5小时取样监测转化进度，反应持续时间为45-50小时，转化结束后进入分离纯化阶段：首先将发酵液在3800-4200rpm离心12-18分钟，上清液经0.45μm滤膜过滤后使用8-12kDa超滤膜进行膜分离；S4分离纯化：分离得到的滤液通过D101大孔树脂柱进行纯化，依次使用纯水洗脱去除极性杂质，然后用25-35%、45-55%、65-75%乙醇进行梯度洗脱，收集目标洗脱段，将收集到的目标组分减压浓缩至适宜浓度，加入适量结晶助剂，在2-6℃条件下静置结晶22-26小时，结晶完成后通过抽滤收集晶体，38-42℃真空干燥得到成品。

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